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冰凍切組織TUBULIN蛋白表達(dá)NBT顯色

 

 

儀器設(shè)備與器具：

1 恒溫培養(yǎng)箱：36±1℃。

2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。

3 接種針。

4 顯微鏡。

5 超凈工作臺。

6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。

7 天平：感量0.01g。

8 滅菌釜。

9 培養(yǎng)皿（直徑為90mm）、試管，經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。

10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片

基本概念：

(1)菌群：由多種細(xì)菌混合組成的相對穩(wěn)定的細(xì)菌群體，具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。

(2) 菌屬：菌種的上一級分類，通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個菌屬，如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。

(3)是細(xì)菌最基本的分類單位，通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體，與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異；當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時，菌種是指細(xì)菌的種子（用來長期保存）資源。

(4) 菌型：同一菌種的不同細(xì)菌，在某些方面存在較小差異的為同一菌型，通常一個菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。

(5) 菌株：由一個獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代，一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。

 

培養(yǎng)及打管說明：

1、安瓿瓶開封：用浸過75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴入安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中，并在建議的條件下培養(yǎng)。

3、注意事項(xiàng)：菌種活化前，請將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后，延遲期較長，需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長

4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。

木蝴蝶苷B;Oroxin B 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg 肌球蛋白輕鏈3抗體  

金松雙黃;Sciadopitysin 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢 HFSF(人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

纈質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP30 Valsartan  豬髖動脈內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱：PIEC

高烏素;Lappaconitin 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢 大豆蛋白胨/大豆胨/植物蛋白胨/豆胨/Peptone From SoybeanBR250克國產(chǎn)/進(jìn)口

DL-乳(85~90%，BR) 質(zhì)量規(guī)格：85~90%，BR DL-Lactic acid COS-7(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

甜葉懸鉤子苷;Rubusoside 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢 INS-1(大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

三油甘油酯 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%;0.15ml 樣生長因子1抗體 Xtrp2 ELISA Kit X-轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(Xtrp2)ELISA試劑盒

十七碳酯（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：內(nèi)標(biāo) METHYL HEPTADECANOATE 苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

隱丹參;Cryptotanshin 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg 白細(xì)胞抗原抗體A抗體 C4b ELISA Kit 補(bǔ)體成分4b(C4b)ELISA試劑盒

氧化鋅(>98%,BC) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC Zinc oxide TYGPN培養(yǎng)基/TYGPN MediumBR250克國產(chǎn)/進(jìn)口

番瀉苷 B 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%；20mg/vial 白介素-17C抗體 TRPT1 ELISA Kit tRNA轉(zhuǎn)移1(TRPT1)ELISA試劑盒

發(fā)  英文名稱：Fermented Cordyceps powder   保存：-20℃   規(guī)格：0.5g 類固脫樣蛋白NSDHL抗體  

皂甙 Rh1 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial 血紅素氧合 1/熱休克蛋白32抗體 HPA ELISA Kit 肝素(HPA)ELISA試劑盒

Arthrobacterwoluwensis規(guī)格愈創(chuàng)木 CAS  規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

白果 CAS 33570-04-6 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

遠(yuǎn)志皂 CAS 2469-34-3 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

-3-O-β-D-槐糖苷 CAS 19895-95-5 規(guī)格： 10mg 訂購|咨詢

石斛堿 CAS 2115-91-5 規(guī)格： 10mg 訂購|咨詢

皂苷Rb1 CAS 41753-43-9 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

派立辛 CAS 62499-28-9 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

7－羥基馬兜鈴酸 A CAS 79185-75-4 規(guī)格： 10mg 訂購|咨詢

乙酸酯 CAS 20347-65-3 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

齊 CAS 508-02-1 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

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黃芪皂苷III CAS 84687-42-3 規(guī)格： 10mg 訂購|咨詢

光甘草定 CAS 59870-68-7 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

紫草素 CAS 517-89-5 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

操作步驟如下：

1 液體石蠟的準(zhǔn)備 選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟，將液體石蠟分裝加塞，用牛皮紙包好，采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌：121℃濕熱滅菌30min，置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分，經(jīng)無菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個小時，冷卻后，經(jīng)無菌檢查后備用。

2 斜面培養(yǎng)物的制備   參照定期移植法。

3 灌注石蠟  將無菌的液體石蠟在無菌條件*入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右，使菌體與空氣隔絕。

4 保藏 4.1　注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫（4～6℃）干燥處保藏，保藏時間2～10年。 4.2　保藏期間應(yīng)定期檢查，如培養(yǎng)基露出液面，應(yīng)及時補(bǔ)充無菌的液體石蠟。

5 恢復(fù)培養(yǎng)   恢復(fù)培養(yǎng)時，挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上，生長繁殖后，再重新轉(zhuǎn)接一次。