培養(yǎng)及打管說(shuō)明:
1、安瓿瓶開(kāi)封:用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開(kāi)的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過(guò)渡類(lèi)型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類(lèi),通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌最基本的分類(lèi)單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類(lèi)細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來(lái)長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱(chēng)為該菌種的一個(gè)菌株。
操作步驟如下:
1 液體石蠟的準(zhǔn)備 選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟,將液體石蠟分裝加塞,用牛皮紙包好,采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌:121℃濕熱滅菌30min,置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分,經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個(gè)小時(shí),冷卻后,經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。
2 斜面培養(yǎng)物的制備 參照定期移植法。
3 灌注石蠟 將無(wú)菌的液體石蠟在無(wú)菌條件*入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右,使菌體與空氣隔絕。
4 保藏 4.1 注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫(4~6℃)干燥處保藏,保藏時(shí)間2~10年。 4.2 保藏期間應(yīng)定期檢查,如培養(yǎng)基露出液面,應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無(wú)菌的液體石蠟。
5 恢復(fù)培養(yǎng) 恢復(fù)培養(yǎng)時(shí),挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長(zhǎng)繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次。
猴胚外胚層發(fā)育蛋白(EED)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴異體移植炎性因子1(AIF1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴胱天14(CASP14)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴抗白蛋白抗體(AAA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴Dickkopf 相關(guān)蛋白4(DKK4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴平滑肌肌動(dòng)蛋白α2(ACTα2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴骨保護(hù)素(OPG)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴殺性/通透性增加蛋白(BPI)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴FMS樣激3(Flt3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴G蛋白β1(GNβ1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子13(TAF13)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴血管緊張素III(ANG III)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
熱紫鏈霉菌熱紫亞種價(jià)格氣單胞培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250用于氣單胞分離培養(yǎng)
產(chǎn)氣莢膜瓊脂基礎(chǔ) (OPSP) (CM0543) Oxoid
Peptone P 蛋白胨P Oxoid500g
Pseudomonas Isolation Agar
TCBS agar Vibrio selective agar TCBS瓊脂/弧選擇瓊脂 1.10263.0500MERCK默克
China blue-lactose agar 中國(guó)藍(lán)乳糖瓊脂 1.02348.0500MERCK默克
念珠顯色培養(yǎng)基A 1000 mL/瓶
堿性蛋白胨水(APW) 1000(g)
亞利桑那瓊脂(SA) 100(g)
R2A 瓊脂 250(g)
十六烷三甲基瓊脂 (CM0579) Oxoid