詳細介紹
細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現(xiàn)貨,超低比價,產品名稱貨期短,價格優(yōu),售后齊全。
產品名稱:NCI-H1703(肺鱗癌細胞)
規(guī)格:5×106cells
貨號:YS-02X9896
產品分類:細胞系
儲存條件2℃-8℃,避光儲存
運輸條件冰袋冷藏運輸
注意事項
1、使用產品時應注意無菌操作,避免污染。
2、本產品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3、為保持本產品的最佳使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4、所有產品請于保質期內使用,超出保質期,必須放棄使用。
5、本產品只供進一步科研使用,不可應用于臨床等其他方面。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞復蘇步驟:
1:水浴鍋預熱至37℃?zhèn)溆?/span>
2:準備15mL離心管,并向其中加入適量培養(yǎng)基待用
3:將細胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出,放入PE手套中,迅速投入水浴鍋
4:用力搖晃凍存管,使其在1分鐘內融化
5:用紙巾擦拭水漬,轉移至生物安全柜。用移液槍吸取細胞懸液,緩慢滴加到步驟2中準備好的離心管
6:1200rpm離心3分鐘
7:棄上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞,接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中
丙二酸鈉培養(yǎng)基 英文名稱:Malonate Broth 產品規(guī)格:10
衛(wèi)矛半固體瓊脂 英文名稱:Dulcitol Semisolid Agar 產品規(guī)格:10
XLD培養(yǎng)基 英文名稱:Xylose Lysine Desoxycholate Medium 產品規(guī)格:250g
WS瓊脂 英文名稱:WS Salmonella Agar 產品規(guī)格:250g
葡萄糖銨培養(yǎng)基 英文名稱:Ammonium Dextrose Medium 產品規(guī)格:250g
葡萄糖半固體培養(yǎng)基 英文名稱:Dextrose Semisolid Medium 產品規(guī)格:250g
動力-吲哚-尿素培養(yǎng)基基礎(MIU) 英文名稱:Motility Indol Urea Medium Base 產品規(guī)格:250g
SIM培養(yǎng)基 英文名稱:Hydrogen Sulfide Indole Motility Medium 產品規(guī)格:250g
乳糖肉湯 英文名稱:Lactose Broth 產品規(guī)格:250g
煌綠瓊脂 英文名稱:Brilliant Green Agar 產品規(guī)格:250g
NCI-H1703(肺鱗癌細胞)胡椒(白胡椒) 規(guī)格: 0.5g
524-17-4蝙蝠葛;Dauricine 規(guī)格: 20mg
11021-14-0人參皂甙 Rc 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
544-63-8豆蔻;Myristic acid 規(guī)格: 20mg
52328-98-0二甲基姜黃 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
40957-83-3黃豆黃 規(guī)格: 20mg
552-41-0丹皮;芍藥;牡丹 規(guī)格: HPLC≥99%,20mg/支
11021-14-0人參皂Rc 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
野馬追內酯A 規(guī)格: 20mg
5088-90-4蓮心高鹽;Liensinine p 規(guī)格: 20mg