ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱：D蛋白免費(fèi)代測試劑盒說明
英文名稱：Gasdermin-D
檢測范圍：0.625ng/mL~20ng/mL
貨號(hào)：YS-E989225
?保存條件：2-8℃低溫保存
保質(zhì)期：6個(gè)月，所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分：酶標(biāo)板，試劑，標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型：
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-42個(gè)樣本

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成：

樣本要求：
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1、手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘，根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。
2、自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果，因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的，不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會(huì)得到的檢測結(jié)果。
4、在儲(chǔ)存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染，試劑避免受到微生物的污染，因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。 
6、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8、有效期：6個(gè)月。
IL1RAPL1 Others Human  IL-1R8 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸伐昔洛韋水合物質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Valacyclovir  hydrate

A-375 [A375], 惡性素瘤細(xì)胞株17-酮基維庫溴銨質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口17-Keto Vecuronium Bromide

NINJ1 Others Rat 大鼠 Ninjurin-1 / NINJ1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 3-去乙?；S庫溴銨質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口3-Desacetyl Vecuronium

大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL玉米素核苷同分質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Zeatin riboside mixed Isomers

B95-8絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞 B95-8 EBV conversion of leukocyte marmoset RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS鹽酸多沙普侖質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Doxapram
胚胎腸粘膜組織來源細(xì)胞;CCC-HIE-2液體生物防腐劑，英文名或英文縮寫：Proclin 300，級(jí)別：AR，99%，規(guī)格：25克

ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 碳醋鉍;減式碳醋鉍;碳醋氧鉍;碳醋鉍 BisMuth subccronctq;BisMuth(III) ccronctq bcsic;BisMuth oxyccronctq 289-10-4

非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-磺酸，英文名或英文縮寫：Sulfamic acid，級(jí)別：BR，97%，規(guī)格：500克

CW-2細(xì)胞，結(jié)腸癌細(xì)胞 色素瘤細(xì)胞,A875細(xì)胞 急性早幼粒白血病細(xì)胞;HL-60PEPSTATIN胃蛋白酶抑制劑蛋白組學(xué)級(jí)25MG26305-03-3COLD

HCT-15(結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(果膠酶Y-23)
EL4小鼠瘤細(xì)胞 EL4 mouse lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSFerricphosphatedihydrate嶙酸高鐵二水物5毫克高

白細(xì)胞介素-17超家族筋骨草甾酮C Ajugasterone C (HPLC,≥98%) 23044-80-6 10MG 標(biāo)準(zhǔn)品

腦血管周細(xì)胞 (HBVP) ( 5×105 ) 臍靜脈平滑肌細(xì)胞 MDA-MB-231(ATCC來源), 癌細(xì)胞2-脫氧-2-拂-D-葡萄糖 Fludqoxyglucosq 970-43-0

CM-R041大鼠肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL鹽酸黃，英文名或英文縮寫：Acriflavine xy7nochloride，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：25克

IFNGR1 Others Rat 大鼠 IFNGR / IFNGR1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 硅酯　H-295NA
D蛋白免費(fèi)代測試劑盒說明胰腺癌細(xì)胞;AsPC-1菊酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Etofenprox質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%

ADAM15 Others Mouse 小鼠 ADAM15 / MDC15 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 乙蒜素(標(biāo)準(zhǔn)品)Ethylicin質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%

MDA-MB-453 癌細(xì)胞芥酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Erucic acid質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

NCI-H1650非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H1650 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBSa-硫丹(標(biāo)準(zhǔn)品)α-Endosulfan質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

MIF Protein Mouse 重組小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白 (His 標(biāo)簽)a-硫丹標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=5%)α-Endosulfan solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=5%
使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。，酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。