產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
英文名稱 | Recombinant TTK Protein Kinase (TTK) | 物種 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) |
來(lái)源 | 原核表達(dá) | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
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更新時(shí)間:2023-03-30 14:34:07瀏覽次數(shù):360
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
英文名稱 | Recombinant TTK Protein Kinase (TTK) | 物種 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) |
來(lái)源 | 原核表達(dá) | 應(yīng)用 | Cell culture; Activity Assa |
僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 性狀 | 來(lái)源 |
TTK蛋白激酶(TTK)重組蛋白 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) | 凍干粉 | 原核表達(dá) |
英文名稱:Recombinant TTK Protein Kinase (TTK)
MPS1; MPS1L1; CT96; PYT; Cancer/Testis Antigen 96; Phosphotyrosine picked threonine-protein kinase; Dual specificity protein kinase TTK
酶與激酶
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測(cè)分子量:28.9kDa
實(shí)際分子量:30kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Glu570~Met787 (Accession # D4A4S7) with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):7.3
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測(cè)和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒(méi)太大的問(wèn)題。
注意事項(xiàng):
1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí)。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
相關(guān)產(chǎn)品:
AMP激活蛋白激酶γ3(PRKAg3)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來(lái)源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉
樣糖基轉(zhuǎn)移酶(LARGE)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,人) 來(lái)源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉
甲基轉(zhuǎn)移酶樣蛋白21C(METTL21C)重組蛋白 物種; Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 來(lái)源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1、樣品前處理:
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,然后再裂解。
c)對(duì)于組織樣品: 切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
腸道病毒組PCR檢測(cè)試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Enterovirus(EV)ARTPCR
產(chǎn)紫青霉PCR檢測(cè)試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Penicillium purpurogenumPCR
產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Clostridium perfringensPCR
差異支原體PCR檢測(cè)試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Mycoplasma disparPCR
大鼠細(xì)胞球蛋白(CYGB)ELISA試劑盒 ,英文名: CYGB ELISA Kit
Mouse growth hormone releasing peptide (GHRP) ELISA Kit 小鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒
Mouseplateletactivatingfactor,PAFELISAKIT 小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHSP47ELISAKit大鼠熱休克蛋白47規(guī)格:48T/96T
細(xì)胞L-乳酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitIL-1α大鼠白介素1α規(guī)格:48T/96T
TTK蛋白激酶(TTK)重組蛋白雞減蛋綜合征病毒PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Egg Drop Syndrome Virus1976(EDSV76)1976PCR
雞類圓線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Strongyloides aviumPCR
雞瘧原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Plasmodium gallinaceumPCR
雞胚致死孤兒病毒PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Chicken Embro Lethal Orphan Virus(CELOV)PCR