詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)!
產(chǎn)品名稱(chēng):乙酰肝素鹽免費(fèi)代測(cè)試劑盒說(shuō)明
英文名稱(chēng):Heparan sulfate
檢測(cè)范圍:25nmol/L~800nmol/L
貨號(hào):YS-E989241
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個(gè)月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-42個(gè)樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說(shuō)明書(shū) | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
2、自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測(cè)效果,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說(shuō)明操作才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果。
4、在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
6、剛開(kāi)啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。
8、有效期:6個(gè)月。
IL6 Protein Mouse 重組小鼠 IL6 / Ierleukin-6 蛋白(-)-莨菪堿,L-天仙子胺,澳洲毒茄堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品(-)-Hyoscyamine
Romas(瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 WI-38(二倍體胚肺細(xì)胞)葡聚糖D70/右旋糖苷質(zhì)量規(guī)格:Mw:63000~77000,USP32Dextran D70
CL-0124IMR-32(神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2右旋糖苷/葡聚糖D40質(zhì)量規(guī)格:Mw35 000 to 45 000Dextran D40
TNFSF8 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 葡聚糖D20/右旋糖苷質(zhì)量規(guī)格:MW:16000~24000Dextran D20
腸平滑肌細(xì)胞裂解物HISMCL (R)-(-)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙醇(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) (R)-(-)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol
永生化細(xì)胞;CNLMG-B5538LC 肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLTributylphosphite亞嶙酸正丁酯100克BR,97%
絨毛間葉成纖維細(xì)胞RNAHVMF miRNA5 μg本同;基本基同;酰本 ccqtophqnonq;Mqthyl phqnyl kqtonq;BqnzoylMqthcnq;Hypnonq;Phqnylqthcnonq;ccqtylbqnzqnq 98-86-
SERPINB6B Others Mouse 小鼠 Serpinb6b 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex LH-20 Null 25G 分離試劑
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7Span40司班401公斤BR
CW-2細(xì)胞,結(jié)腸腺癌細(xì)胞 皮膚T細(xì)胞瘤,Hut-78細(xì)胞 成骨肉瘤細(xì)胞;MG-63GlycogenTypeIII 100mg/500mg/1g原裝 Sigma G8876
CLEC7A Others Human CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Z-Asn-OHN-芐氧羰基-L-天冬酰胺250毫克BR,98%
大鼠肝星形細(xì)胞RHSteC1-己流醇;1-;流代 1-Hqxcnqthiol;Hqxyl Mqrccptcn;n-Hqxcnqthiol;Mqrccptcn C6;priM-n-Hqxyl Mqrccptcn
NCI-H596[H596]細(xì)胞,肺癌細(xì)胞 腎癌細(xì)胞,SK-RC-42細(xì)胞 肝星形細(xì)胞HHSteCTaqplus酶shēng huà shì jì容量:1公斤
小香豬皮膚細(xì)胞;SSC-S2Thiourea500克BR,99%
NCR3 Others Human NKp30 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 367-86-24-扶-3-硝基三扶4-Fluoro-3-nitnobenzotrifluoride
乙酰肝素鹽免費(fèi)代測(cè)試劑盒說(shuō)明小鼠成纖維細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)木栓酮(標(biāo)準(zhǔn)品)FRIEDELIN質(zhì)量規(guī)格:鑒別
男性正常細(xì)胞;Hs68 結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL表木栓醇(標(biāo)準(zhǔn)品)FRIEDELAN-3BETA-OL質(zhì)量規(guī)格:鑒別
成纖維細(xì)胞-裂解物HDF-a L老龍皮酸;網(wǎng)脊衣酸 A(標(biāo)準(zhǔn)品)(4S)-2α,3β-Dihydroxy-D:C-friedo-B':A'-neogammacer-9(11)-en-23-oic acid質(zhì)量規(guī)格:鑒別用
SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 焦性沒(méi)食子酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Pyrogallol質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞;786-O [786-0]正十九烷(標(biāo)準(zhǔn)品) N-NONADECANE 質(zhì)量規(guī)格:內(nèi)標(biāo)
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱(chēng)為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。