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          泛素樣修飾激活酶5(UBA5)重組蛋白

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          更新時間:2023-03-31 15:51:50瀏覽次數:308

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          產品簡介

          供貨周期 現貨 規(guī)格 詳見說明書
          應用領域 化工 主要用途 科研
          英文名稱 Recombinant Ubiquitin Like Modifier Activatin 物種 Homo sapiens (Human,人)
          來源 原核表達 應用 Cell culture; Activity Assa
          泛素樣修飾激活酶5(UBA5)重組蛋白的相關產品:脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)重組蛋白 物種; Bos taurus; Bovine (Cattle,牛) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 磷酸鹽胞苷轉移酶1β(PCYT1b)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 氨基酰化酶1(ACY1)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Hu

          詳細介紹

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          僅供科研實驗產品屬性:

          產品名稱

          物種

          性狀

          來源

          泛素樣修飾激活酶5(UBA5)重組蛋白

          Homo sapiens (Human,人)

          凍干粉

          原核表達

          英文名稱:Recombinant Ubiquitin Like Modifier Activating Enzyme 5 (UBA5)

          UBE1DC1; ThiFP1; UFM1-activating enzyme; Ubiquitin-Activating Enzyme E1-Domain Containing 1; Ubiquitin-activating enzyme E1 domain-containing protein 1

          酶與激酶

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          來源:原核表達

          宿主E.coli

          內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

          亞細胞定位::分泌

          預測分子量:23.1kDa

          實際分子量:23kDa(差異分析請參閱說明書)

          片段與標簽:Met1~Lys173 with N-terminal His Tag

          緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% TrehaloseProclin300.

          性狀:凍干粉

          純度:> 95%

          等電點:6.1

          應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

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          標簽選擇:

          親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據具體案例來分析。

          不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

          真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

          a.      選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHOHEK293

          b.      表達載體的構建

          c.      無內毒素的質粒抽提

          d.      細胞瞬時轉染

          e.      表達小試,條件優(yōu)化

          f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAEWB

          g.      大量表達

          h.      親和純化

          i.        檢測和鑒定

          原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

          a.      選擇表達載體

          b.      密碼子優(yōu)化

          c.      基因合成/亞克隆

          d.      轉化表達菌株

          e.      蛋白表達小試分析

          f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

          g.      如果蛋白不可溶,則需要變復性來制備可溶蛋白。

          h.      鑒定,包括SDS-PAGEWB鑒定

          GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測

            誘導表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應該順當,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

          操作步驟 :

          根據使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫?span>PMSF 現用現加)。

          1、樣品前處理:

          a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。

          b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。

          c)對于組織樣品: 切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

          2、后處理:

          將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

          人類嗜淋巴細胞病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Human Tcell Lymphoma Virus 1(HTLV1)T1RTPCR 50T

          溶組織內阿米巴PCR檢測試劑盒 英文名稱; Entamoeba histolyticaPCR 50T

          三日瘧原蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Plasmodium malariaePCR 50T

          圣路易斯腦炎病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; St.Louis Encephalitis Virus(SLEV)RTPCR 50T

          SNAP-25 (synaptosomal-associated protein 25) 突觸相關膜蛋白25抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

          Anti-BMP6 骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          Rhesus antibody Rh PFK2/PFKFB3 60酸果糖2抗體 規(guī)格 0.2ml

          Cyclin D1 濃縮液 0.1ml 進口分裝

          TPST2 英文名稱: 酪蛋白轉移酶2抗體 0.2ml

          CCL12 英文名稱: 單核細胞趨化蛋白5抗體 0.2ml

          Anti-BMP6 骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          泛素樣修飾激活酶5(UBA5)重組蛋白中間葡萄球菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Staphylococcus intermediusPCR

          皺紋毛圓線蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Trichostrongylus rugatusPCR

          豬鞭蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Trichuris suisPCR

          豬腸道甲型冠狀病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Swine Enteric AlphacoronavirusSeACoVPCR

          注意事項:  

          1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。

          2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

          3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

          4、本產品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。

          5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作


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