詳細介紹
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務!
產(chǎn)品名稱:SCAMP3免費代測試劑盒
英文名稱:secretory carrier membrane protein 3
檢測范圍:62.5pg/ml~2000pg/ml
貨號:YS-E989291
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標板,試劑,標準品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標本-2個標準對照-84個樣本
48T指可以做47個標本-1個標準對照-42個樣本
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號標準品 | 150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標準品 | 150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標準品 | 150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標準品 | 150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標準品 | 150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
實驗注意事項:
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次。
2、自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因為所有試劑都是有關(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
6、剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8、有效期:6個月。
MDA-MB-231, 癌細胞N-乙酰氨基葡萄糖(標準品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品N-Acetyl-D-Glucosamine
非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H157 大鼠成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL托吡卡胺(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Tropicamide
H-4-II-E 大鼠肝細胞瘤細胞奧拉西坦(標準品)質(zhì)量規(guī)格:供檢查用Oxiracetam
CD28 Others Human CD28 細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸貝凡洛爾(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Bevantolol
615小鼠前胃癌瘤株;Fc鹽酸奧昔布寧(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Oxybutynin HCl
TNFSF10 Protein Human 重組 TNFSF10 / AIL / APO-2L / CD253 蛋白布里杰35,英文名或英文縮寫:Brij-35,級別:BR,70%,規(guī)格:100毫克
上皮細胞(HMEpiC) (5×105) THP-1單核白血病細胞 Human2-肖基本安(易制暴) 2-nitnocnilinq
胚腎細胞;293 Cells, low passageα-D-半乳糖苷半乳糖水解酶,英文名或英文縮寫:α-Galactosidase preparation from green coffee beans,級別:標準品,7萬u/mg,規(guī)格:5克
SEZ6L2 Others Human SEZ6L2 / PSK-1 細胞裂解液 (陽性對照) 龍膽酸,英文名或英文縮寫:DHB,級別:高,98%,規(guī)格:100克
CL-0392NCI-H2087(非小細胞肺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2554-95-0均本三 95%Trimesic acid
HL-60, 早幼粒白血病細胞 單核細胞-巨噬細胞,RAW264.7細胞 Hep G2(肝癌細胞)1,4-二(4-甲基-5本基-2-咪唑)本1克2~8℃,避光
小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]Perilloxin Perilloxin (HPLC,≥98%) 263249-77-0 5MG 通用試劑
HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) 流化亞鐵;流化鐵 Iron sulfidq 1317-37-9
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞;KM932三氧化二銻10克RT
6. 腸胃細胞系統(tǒng)成套pH緩沖劑NA
SCAMP3免費代測試劑盒滋養(yǎng)層絨毛細胞總RNAHVT NA偏苯三1(>95.0%(T))Trimellitic Anhydride質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)
小鼠神經(jīng)皮質(zhì)細胞(MN-c)(1×106)2,4-二氨基-6-異丙氧基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))2,4-Diamino-6-isopropoxy-1,3,5-triazine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
家貓皮膚細胞;FCA-S12,4-二氨基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))2,4-Diami*,3,5-triazine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32 小鼠成年表皮角質(zhì)形成層細胞*培養(yǎng)基 100mL2,4-氨基-6-甲氧基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))2,4-Diamino-6-methoxy-1,3,5-triazine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
SF9, 昆蟲卵巢細胞 其它2,4-二氨基-6-二甲氨基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))2,4-Diamino-6-dimethylami*,3,5-triazine質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。