產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 詳見說明書 |
---|---|---|---|
應用領域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
英文名稱 | Recombinant 5'-Nucleotidase, Cytosolic IB (NT | 物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
來源 | 原核表達 | 應用 | Cell culture; Activity Assa |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-31 16:06:00瀏覽次數(shù):324
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 詳見說明書 |
---|---|---|---|
應用領域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
英文名稱 | Recombinant 5'-Nucleotidase, Cytosolic IB (NT | 物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
來源 | 原核表達 | 應用 | Cell culture; Activity Assa |
標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達小試,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 性狀 | 來源 |
5'-核苷酸酶ⅠB(NT5C1B)重組蛋白 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | 凍干粉 | 原核表達 |
英文名稱:Recombinant 5'-Nucleotidase, Cytosolic IB (NT5C1B)
AIRP; CN-IB; Autoimmune infertility-related protein
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::分泌
預測分子量:39.1kDa
實際分子量:39kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Arg261~Asn573 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:7.9
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
相關產(chǎn)品:
乳酸脫氫酶C(LDHC)重組蛋白 物種; Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉
谷氨氨肽酶(ENPEP)重組蛋白 物種; Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉
紅素氧合酶2(HO2)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測
誘導表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應該順當,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
馬紅球菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Rhodococcus equiPCR 50T
馬生殖泰勒氏菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Taylorella equigenitalisPCR 50T
毛樣枝孢霉PCR檢測試劑盒 英文名稱; Cladosporium trichoidesPCR 50T
綿羊腺病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Ovine AdenovirusPCR 50T
Slc4a7/Nbcn1(solute carrier family 4, sodium bicaonate cotransporter, member 7) 碳酸氫協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A7抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-BIRC5/Survivin variant 細胞凋亡抑制因子5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PGC1 beta 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體 規(guī)格 0.2ml
ER 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Tubb3/Tubulin beta 3 英文名稱: 微管蛋白β3抗體 0.1ml
CCL14 英文名稱: 嗜酸粒細胞趨化蛋白14抗體 0.2ml
Anti-BIRC5/Survivin variant 細胞凋亡抑制因子5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
5'-核苷酸酶ⅠB(NT5C1B)重組蛋白腸道病毒通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Enterovirus(EV)RTPCR
腸道致細胞病變?nèi)斯聝翰《?span>PCR檢測試劑盒 英文名稱; Enteric Cytopathic Human Orphan Virus(ECHO)RTPCR
腸球菌通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Enterococcus spp.PCR
超廣譜內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; ESBLEscherichia coliβPCR
注意事項:
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作