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          花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白

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          更新時(shí)間:2023-04-03 10:15:11瀏覽次數(shù):351

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 詳見說明書
          應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 科研
          英文名稱 Recombinant Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALO 物種 Homo sapiens (Human,人)
          來源 原核表達(dá) 應(yīng)用 Cell culture; Activity Assa
          花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:單磷酸腺苷脫氨酶3(AMPD3)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉 腸細(xì)胞激酶(ICK)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉 谷光甘肽合成酶(GSS)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠)

          詳細(xì)介紹

          相關(guān)產(chǎn)品:

          雙特異性磷酸酶9(DUSP9)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,人) 來源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉 羧酸酯酶1(CES1)活性蛋白 物種; Homo sapiens (Human,人) 來源; 原核表達(dá) 性狀:凍干粉 海藻糖酶(TREH)真核蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源; 真核表達(dá) 性狀:凍干粉

          僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          物種

          性狀

          來源

          花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白

          Homo sapiens (Human,人)

          凍干粉

          原核表達(dá)

          英文名稱:Recombinant Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALOX15)

          LOX15; 15-LOX2; 15-LOX1; 15-LOX; 12-LOX; ALOX15; 15-LO; 15-LPG; LOG15; Lipoxygenase 15; Arachidonate 12-lipoxygenase, leukocyte-type; Arachidonate omega-6 lipoxygenase

          酶與激酶 代謝通路

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          來源:原核表達(dá)

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

          亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜, 細(xì)胞質(zhì)

          預(yù)測分子量:17.3kDa

          實(shí)際分子量:17kDa(差異分析請參閱說明書)

          片段與標(biāo)簽:Lys170~Leu312 with N-terminal His Tag

          緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% TrehaloseProclin300.

          性狀:凍干粉

          純度:> 95%

          等電點(diǎn):5.2

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

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          標(biāo)簽選擇:

          親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

          不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

          真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

          a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHOHEK293

          b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

          c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

          d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

          e.      表達(dá)小試,條件優(yōu)化

          f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAEWB

          g.      大量表達(dá)

          h.      親和純化

          i.        檢測和鑒定

          原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

          a.      選擇表達(dá)載體

          b.      密碼子優(yōu)化

          c.      基因合成/亞克隆

          d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

          e.      蛋白表達(dá)小試分析

          f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

          g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

          h.      鑒定,包括SDS-PAGEWB鑒定

          GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測

            誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題。

          操作步驟 :

          根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

          1、樣品前處理:

          a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

          b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解。

          c)對于組織樣品: 切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

          2、后處理:

          將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

          差異脲原體PCR檢測試劑盒 英文名稱; Ureaplasma diversumPCR 50T

          產(chǎn)氣腸桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Enterobacter aerogenesPCR 50T

          產(chǎn)酸克雷伯菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Klebsiella oxytocaPCR 50T

          腸道病毒通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Enterovirus(EV)RTPCR 50T

          phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta)(phospho Tyr279 + Tyr216) 0酸化葡萄糖合成3α/β抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

          SCARB2 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 兔單抗 (PE) Mouse

          Rhesus antibody Rh phospho-CREB-1(Ser142) 0酸化CREB-1抗體 規(guī)格 0.1ml

          RNA抽提試劑 100ml 國產(chǎn)

          ZA20D3 英文名稱: 鋅指蛋白20D3抗體 0.2ml

          DLX2 英文名稱: 同源轉(zhuǎn)錄因子DLX2抗體 0.2ml

          SCARB2 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 兔單抗 (PE) Mouse

          花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白沿岸單孢子蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Haplosporidium costalePCR

          煙曲霉PCR檢測試劑盒 英文名稱; Aspergillus fumigatusPCR

          亞洲分枝桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mycobacterium asiaticumPCR

          亞利桑那沙門氏菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Salmonella arizonaePCR

          注意事項(xiàng):  

          1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。

          2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí)。

          3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

          4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時(shí)請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

          5、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作


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