詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱:神經(jīng)絲蛋白H免費(fèi)代測試劑盒說明
英文名稱:Neurofilament protein H
檢測范圍:1.25ng/ml~40ng/ml
貨號:YS-E989329
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個(gè)月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對照-42個(gè)樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
2、自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會(huì)得到的檢測結(jié)果。
4、在儲(chǔ)存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
6、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8、有效期:6個(gè)月。
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L]小鼠成纖維細(xì)胞 NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L] mouse fibroblast cells MEM(NaHCO3 1.5g/L, Pyruvate 0.11g/L)+10%FBSDL-鳥氨酸鹽酸鹽(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCDL-Ornithine, mono
IL1B Protein Human 重組 IL-1 beta / IL1B 蛋白DL-1酸(>99%,BP)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BPDL-Tartaric acid hydrate
PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 RSC96(大鼠雪旺細(xì)胞)D-蘋果酸(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRD-Malic acid
CL-0261BC-022(癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2dGTP;三1酸脫氧鳥苷鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR2'-Deoxyguanosine 5'-triphosphate tri salt
IFNB1 Others Mouse 小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) dCTP;三1酸脫氧胞苷鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR2'-Deoxycytidine 5'-triphosphate di salt
MLF, 小鼠成纖維細(xì)胞外消旋N-去甲基異丙嗪質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口rac N-Demethyl Promethazine
類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN 肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL異丙嗪亞砜質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Promethazine Sulfoxide
視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg4-羥基雷美替胺質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口4-Hydroxy Ramelteon
IL2RG Others Human IL2RG / CD132 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雷美替胺代謝產(chǎn)物M-II (羥基位點(diǎn)R型和S型混合物)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Ramelteon Metabolite M-II (mixture of R and S at the hydroxy position)
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-5(S)-酰基萘普生-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口(S)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide
HGC-27(胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) 臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C假茴香油素,英文名或英文縮寫:Pseudocumol,級別:AR,99%,規(guī)格:1克
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY10023-異酸酯基基三... 3-Isocyanatopropyltrimethoxysilane 15396-00-6 25G 通用試劑
FST Others Human FST / Follistatin ( FS288 ) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硼輕化;四輕硼;輕硼化 litxium borohydridq; 16949-12-8
MuM-2B 眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞十四烷shēng huà shì jì容量:1克
RD惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞 RD human maligna embryonal rhabdomyoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS97-30-3α-甲基D-葡萄糖苷alpha-D-metxylglucoside
神經(jīng)絲蛋白H免費(fèi)代測試劑盒說明肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]瓊脂糖(Biowest,電泳級);西班牙瓊脂糖Agarose質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)口原裝Biowest 111860;電泳級
家貓腎細(xì)胞;CATK1 肝細(xì)胞,HL-7702細(xì)胞 MMQ細(xì)胞,大鼠垂體瘤細(xì)胞聚乙二醇400PEG 400質(zhì)量規(guī)格:BR
臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C消膽胺樹脂;考來1胺Cholestyramine resin質(zhì)量規(guī)格:Each g exchanges 1.8 g- 2.2 g of glycocholate
RBP4 Others Mouse 小鼠 RBP4 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蔗糖Sucrose質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級
神經(jīng)前體細(xì)胞分化培養(yǎng)基NPCMD-海藻糖二水D-(+)-Trehalose, dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。