培養(yǎng)及打管說明:
1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌最基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
操作步驟如下:
1 液體石蠟的準(zhǔn)備 選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟,將液體石蠟分裝加塞,用牛皮紙包好,采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌:121℃濕熱滅菌30min,置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分,經(jīng)無菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個(gè)小時(shí),冷卻后,經(jīng)無菌檢查后備用。
2 斜面培養(yǎng)物的制備 參照定期移植法。
3 灌注石蠟 將無菌的液體石蠟在無菌條件*入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右,使菌體與空氣隔絕。
4 保藏 4.1 注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫(4~6℃)干燥處保藏,保藏時(shí)間2~10年。 4.2 保藏期間應(yīng)定期檢查,如培養(yǎng)基露出液面,應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無菌的液體石蠟。
5 恢復(fù)培養(yǎng) 恢復(fù)培養(yǎng)時(shí),挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次。
人脯氨酰羧肽(PRCP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human PRCP (Prolylcarboxypeptidase) ELISA Kit
人復(fù)制蛋白A(RPA-70)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human RPA-70 (replication protein A) ELISA Kit
人G蛋白偶聯(lián)受體120(GPR120)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human GPR120 (G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit
人富含半蛋白61(Cyr61)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human Cyr61 (Cysteine Rich Protein, Angiogenic Inducer 61) ELISA Kit
人胰腺再生蛋白3α(REG3α)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human REG3α (Regenerating Islet Derived Protein 3 Alpha) ELISA Kit
人富含半型酸性蛋白(SPARC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human SPARC (Secreted Protein Acidic And Rich In Cysteine) ELISA Kit
人豐富α2糖蛋白1(LRG1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human LRG1 (Leucine Rich Alpha-2-Glycoprotein 1) ELISA Kit
人胰腺再生蛋白3γ(REG3γ)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human REG3γ (Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma) ELISA Kit
人S100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human S100A8 (S100 Calcium Binding Protein A8) ELISA Kit
人S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human S100A9 (S100 Calcium Binding Protein A9) ELISA Kit
人G蛋白偶聯(lián)受體37(GPR37)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human GPR37 (G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit
人S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human S100A11 (S100 Calcium Binding Protein A11) ELISA Kit
人S100鈣結(jié)合蛋白A12(S100A12 )聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human S100A12 (S100 Calcium Binding Protein A12) ELISA Kit
人S100鈣結(jié)合蛋白A13(S100A13 )聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human S100A13 (S100 Calcium Binding Protein A13) ELISA Kit
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