儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌最基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
培養(yǎng)及打管說明:
1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體熒光染色鑒定試劑盒 20/100次
細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.fermentans鑒定16S rDNA 20次
PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.hyorhinis鑒定16S rDNA 20次
PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.orale鑒定16S rDNA 20次
PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體M.hominis鑒定16S rDNA 20次
PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒
龜裂鏈霉菌規(guī)格MUC13 粘蛋白13抗體 規(guī)格: 0.2mlPAGE4/GAGE9 前列相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Clenbuterol Hydrochloride(Spiropent) 鹽酸克侖特羅/瘦肉抗體 0.1mlFAR2 脂肪酰A還原2抗體 規(guī)格: 0.2ml
CD19 CD19抗體 規(guī)格: 0.1ml
MRP7/ABCC10 多藥耐藥相關(guān)蛋白7抗體 規(guī)格: 0.1ml
KBTBD4 BTB-kelch蛋白家族4抗體 規(guī)格: 0.2ml
MEIS1 同源盒蛋白Meis1抗體 規(guī)格: 0.1ml
GPX1 肽過氧化1 規(guī)格: 0.2ml
FBXO25 F-box蛋白家族FBXO25抗體 規(guī)格: 0.2ml
Melanoma HMB45/Melanoma/Melan-A/MART-1 黑色素瘤相關(guān)抗原/黑色素-A抗體 規(guī)格: 0.1ml
recPEP 重組豬乙腦病毒結(jié)構(gòu)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
NGN1/Neurogenin 1 神經(jīng)元素1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Ankyrin erythroid 紅細(xì)胞蛋白Ank1抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-IRS1(Ser612) 磷酸化受體底物-1抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-MLF1 Interacting Protein/PBIP1(Thr78) 磷酸化卡波西氏肉瘤皰疹病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
操作步驟如下:
1 液體石蠟的準(zhǔn)備 選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟,將液體石蠟分裝加塞,用牛皮紙包好,采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌:121℃濕熱滅菌30min,置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分,經(jīng)無菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個(gè)小時(shí),冷卻后,經(jīng)無菌檢查后備用。
2 斜面培養(yǎng)物的制備 參照定期移植法。
3 灌注石蠟 將無菌的液體石蠟在無菌條件*入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右,使菌體與空氣隔絕。
4 保藏 4.1 注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫(4~6℃)干燥處保藏,保藏時(shí)間2~10年。 4.2 保藏期間應(yīng)定期檢查,如培養(yǎng)基露出液面,應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無菌的液體石蠟。
5 恢復(fù)培養(yǎng) 恢復(fù)培養(yǎng)時(shí),挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長(zhǎng)繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次。