細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,產(chǎn)品名稱貨期短,價格優(yōu),售后齊全。
產(chǎn)品名稱:NCI-H358(非小細胞肺癌細胞)
規(guī)格:5×106cells
貨號:YS-02X9906
產(chǎn)品分類:細胞系
儲存條件2℃-8℃,避光儲存
運輸條件冰袋冷藏運輸
注意事項
1、使用產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4、所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5、本產(chǎn)品只供進一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞復(fù)蘇步驟:
1:水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?/span>
2:準備15mL離心管,并向其中加入適量培養(yǎng)基待用
3:將細胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出,放入PE手套中,迅速投入水浴鍋
4:用力搖晃凍存管,使其在1分鐘內(nèi)融化
5:用紙巾擦拭水漬,轉(zhuǎn)移至生物安全柜。用移液槍吸取細胞懸液,緩慢滴加到步驟2中準備好的離心管
6:1200rpm離心3分鐘
7:棄上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞,接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中
MEP1A/Meprin alpha/PPHA 甲肽解抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-PLC γ1 (Tyr783) 磷化磷酯Cγ1抗體 規(guī)格: 0.1ml
UEVLD/UEV3 泛結(jié)合E2樣抗體 規(guī)格: 0.2mlSLC27A2/ACSVL1 鏈脂肪連接抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-CENP-A (Ser7) 磷化著絲粒A 規(guī)格: 0.1mlNCX1/SLC8A1 鈉鈣交換1抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-ATG7(Ser95) 磷化自噬相關(guān)7抗體 規(guī)格: 0.1mlINPPL1 肌聚磷鹽磷樣1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Collagen XI alpha 2 膠原11A2抗體 規(guī)格: 0.2ml
FOXM1/HFH 11 叉M1抗體 規(guī)格: 0.2ml
His tag 聚組氨抗體標簽抗體 規(guī)格: 0.1ml
PRDX3/peroxiredoxin 3 過氧化還原3抗體 規(guī)格: 0.1ml
PNPT1 多核磷化抗體 規(guī)格: 0.2ml
LARG Rho的鳥核交換因子12抗體 規(guī)格: 0.2ml
Hepcidin-25 鐵調(diào)節(jié)25抗體 規(guī)格: 0.2ml
NCI-H358(非小細胞肺癌細胞)澳洲茄胺;澳州茄胺 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支;
80681-44-3亥茅 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
依帕司他 規(guī)格: 50mg
112885-42-4枸櫞莫必利 規(guī)格: 100mg
26833-87-4高三尖杉酯 規(guī)格: 20mg
番石榴葉 規(guī)格: 0.5g
;純品型;標準品;有證書 規(guī)格: 0.1g
61281-37-6五味子甲 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
陳皮炭 規(guī)格: 0.5g
3877-86-9D 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg