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產(chǎn)品名稱:EA.hy926(臍靜脈細胞融合細胞)
規(guī)格:5×106cells
貨號:YS-02X9780
產(chǎn)品分類:細胞系
儲存條件2℃-8℃,避光儲存
運輸條件冰袋冷藏運輸
注意事項
1、使用產(chǎn)品時應注意無菌操作,避免污染。
2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4、所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5、本產(chǎn)品只供進一步科研使用,不可應用于臨床等其他方面。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞復蘇步驟:
1:水浴鍋預熱至37℃?zhèn)溆?/span>
2:準備15mL離心管,并向其中加入適量培養(yǎng)基待用
3:將細胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出,放入PE手套中,迅速投入水浴鍋
4:用力搖晃凍存管,使其在1分鐘內(nèi)融化
5:用紙巾擦拭水漬,轉(zhuǎn)移至生物安全柜。用移液槍吸取細胞懸液,緩慢滴加到步驟2中準備好的離心管
6:1200rpm離心3分鐘
7:棄上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞,接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中
AVPR2 氨加壓受體2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Bov IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml
FOG1 GATA結(jié)合1伴侶抗體 規(guī)格: 0.2ml
PDZD8 PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK8抗體 規(guī)格: 0.2mlNCK2/Nck beta NCK銜接2抗體 規(guī)格: 0.2ml
GCET1 B淋細胞生發(fā)中心相關(guān)抗體 規(guī)格: 0.2ml
C20orf43 20號染色體開放閱讀框43抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse anti-Goat IgG ascites 小鼠抗羊IgG腹 規(guī)格: 1ml
SLPI/ALK1 分泌型白細胞抑制因子抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗牛IgM 規(guī)格: 0.1ml
SDCCAG10 結(jié)腸抗原10抗體 規(guī)格: 0.2ml
RBP/Retinol binding protein 視黃結(jié)合抗體 規(guī)格: 0.1ml
EA.hy926(臍靜脈細胞融合細胞)卡洛爾 規(guī)格: 50mg
對磷;純品型;標準品;有證書 規(guī)格: 0.1g
80681-45-4升 規(guī)格: 20mg
6882-68-4;83148-91-8;641-39-4槐定 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
94596-27-7洋川芎內(nèi)酯H 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
白頭翁 規(guī)格: 1g
2450-53-53,5-O-二啡酰基奎寧;3,5-D 規(guī)格: 20mg
37239-51-3定 規(guī)格: 10mg
茅膏菜 規(guī)格: 1.0g
99129-21-2烯草;純品型;標準品;有證書 規(guī)格: 0.1g
細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。