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詳細(xì)介紹
準(zhǔn)備物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀釋液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
產(chǎn)品名稱 | 轉(zhuǎn)基因構(gòu)建OTP增強(qiáng)子-CrylA基因PCR試劑盒 |
英文名稱 | Construction of OTP enhancer cryla gene PCR kit by transgenic |
貨號(hào) | YSP97009 |
?自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATG隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
產(chǎn)品僅用于科研引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
EFNA5 Others Mouse 小鼠 EFNA5 / Ephrin-A5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人氣管上皮細(xì)胞RNAHTEpiC miRNA5 μg
狗間葉干細(xì)胞(脂肪)(5×105)
615小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤瘤株;DCS 小鼠軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
細(xì)胞名稱 種屬
小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L2
phospho-ATP citrate lyase(Ser455) 磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格： 0.1ml
phospho-Ataxin-1(Ser775) 磷酸化失調(diào)癥蛋白1標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格： 0.1ml
AVEN 凋亡、半胱酸蛋白酶激活抑制劑標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格： 0.2ml
Kir6.2 ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格： 0.2ml
AVPR2 精氨酸加壓素受體2標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格： 0.2ml
鹽酸尼非卡蘭(標(biāo)準(zhǔn)品) 規(guī)格：>98.0% Ropinirole HCl
鹽酸尼非卡蘭 規(guī)格：>99%,BR,一水合物 Ropivacaine hydrochloride
鹽酸萘替芬（標(biāo)準(zhǔn)品） 規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ropivacaine hydrochloride
鹽酸萘唑啉（標(biāo)準(zhǔn)品） 規(guī)格：>99%,BR Rosuvastatin Calcium
鹽酸奈福泮（標(biāo)準(zhǔn)品） 規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rosuvastatin Calcium
鹽酸納曲酮 規(guī)格：≥98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Sitagliptin phosphate monohydrate
鹽酸納洛酮 規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Sitagliptin phosphate monohydrate
鹽酸莫西沙星（標(biāo)準(zhǔn)品） 規(guī)格：>95%,BR Spectinomycin Hydrochloride
鹽酸莫西沙星 規(guī)格：含量測(cè)定 Spectinomycin Hydrochloride
鹽酸莫索尼定（標(biāo)準(zhǔn)品） 規(guī)格：>98.5%,EP6.5 Tamsulosin hydrochloride
轉(zhuǎn)基因構(gòu)建OTP增強(qiáng)子-CrylA基因PCR試劑盒磷酸化氨基末端激酶1/2/3抗體 英文縮寫：IP3
磷酸化蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗體 英文縮寫：IP3 receptor
氨基末端激酶2抗體 英文縮寫：IPMK
連接介導(dǎo)調(diào)節(jié)蛋白抗體 英文縮寫：IQCA1
氨基末端激酶3抗體 英文縮寫：IQCC
磷酸化活化蛋白激酶B抗體 英文縮寫：IQCD
JmjC結(jié)構(gòu)域組蛋白去甲基化酶H3-K36抗體 英文縮寫：IQCE
組蛋白去甲基化酶JARID2抗體 英文縮寫：IQCF1
JAK和微管相互作用蛋白2抗體（JAK和微管相互作用蛋白2） 英文縮寫：IQCG
活化蛋白激酶B抗體 英文縮寫：IQCJ
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