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產(chǎn)品名稱:ZR-75-1(人乳腺癌細胞)
規(guī)格:5×106cells
貨號:YS-02X9756
產(chǎn)品分類:細胞系
儲存條件2℃-8℃,避光儲存
運輸條件冰袋冷藏運輸
注意事項
1、使用產(chǎn)品時應注意無菌操作,避免污染。
2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4、所有產(chǎn)品請于保質期內使用,超出保質期,必須放棄使用。
5、本產(chǎn)品只供進一步科研使用,不可應用于臨床等其他方面。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞復蘇步驟:
1:水浴鍋預熱至37℃?zhèn)溆?/span>
2:準備15mL離心管,并向其中加入適量培養(yǎng)基待用
3:將細胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出,放入PE手套中,迅速投入水浴鍋
4:用力搖晃凍存管,使其在1分鐘內融化
5:用紙巾擦拭水漬,轉移至生物安全柜。用移液槍吸取細胞懸液,緩慢滴加到步驟2中準備好的離心管
6:1200rpm離心3分鐘
7:棄上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞,接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中
雞降鈣素原(PCT)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雞基質金屬8(MMP-8)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雞表皮生長因子受體2(EGFR2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雞免疫球蛋白A2 (IgA2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雞對氧磷1(PON1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雞促甲狀腺胚胎因子(TEF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雞N-乙酰α-D-氨基葡萄糖苷(NAGLU)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雞低氧誘導因子1α (HIF-1α)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雞肥大細胞類(MCT)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雞伴刀豆球蛋白A(ConA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雞蛋白磷酸受體B(PTPRB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雞細胞色素P450家族成員7A1(CYP7A1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雞β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雞窖蛋白(Cav-1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
ZR-75-1(人乳腺癌細胞)11013-97-1甲基橙皮(95%) 規(guī)格: 20mg
白花丹 規(guī)格: 1g
111991-09-4煙嘧磺隆;純品型;標準品;有證書 規(guī)格: 0.1g
518-17-2吳茱萸 規(guī)格: 20mg
81103-11-9克拉 規(guī)格: 200mg
79165-06-3甘草二銨鹽 規(guī)格: UV≥98%;20mg
548-83-4?高良姜 規(guī)格: 20mg
84-26-4吳茱萸次;Rutaecarpine 規(guī)格: 20mg
53963-43-2人參皂F1 規(guī)格: 20mg
地膽草 規(guī)格: 2.5g
細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。