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操作步驟如下：

1 液體石蠟的準(zhǔn)備 選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟，將液體石蠟分裝加塞，用牛皮紙包好，采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌：121℃濕熱滅菌30min，置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分，經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個(gè)小時(shí)，冷卻后，經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。

2 斜面培養(yǎng)物的制備   參照定期移植法。

3 灌注石蠟  將無(wú)菌的液體石蠟在無(wú)菌條件*入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右，使菌體與空氣隔絕。

4 保藏 4.1　注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫（4～6℃）干燥處保藏，保藏時(shí)間2～10年。 4.2　保藏期間應(yīng)定期檢查，如培養(yǎng)基露出液面，應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無(wú)菌的液體石蠟。

5 恢復(fù)培養(yǎng)   恢復(fù)培養(yǎng)時(shí)，挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上，生長(zhǎng)繁殖后，再重新轉(zhuǎn)接一次。

 

 

儀器設(shè)備與器具：

1 恒溫培養(yǎng)箱：36±1℃。

2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。

3 接種針。

4 顯微鏡。

5 超凈工作臺(tái)。

6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。

7 天平：感量0.01g。

8 滅菌釜。

9 培養(yǎng)皿（直徑為90mm）、試管，經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。

10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片

基本概念：

(1)菌群：由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體，具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過(guò)渡類型。

(2) 菌屬：菌種的上一級(jí)分類，通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬，如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。

(3)是細(xì)菌最基本的分類單位，通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體，與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異；當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí)，菌種是指細(xì)菌的種子（用來(lái)長(zhǎng)期保存）資源。

(4) 菌型：同一菌種的不同細(xì)菌，在某些方面存在較小差異的為同一菌型，通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。

(5) 菌株：由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代，一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。

 

培養(yǎng)及打管說(shuō)明：

1、安瓿瓶開(kāi)封：用浸過(guò)75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴入安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中，并在建議的條件下培養(yǎng)。

3、注意事項(xiàng)：菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后，延遲期較長(zhǎng)，需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)

4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開(kāi)的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。

HB EGF/DTSF  肝結(jié)合性表皮生因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mafa  v-maf 肌腱膜纖維肉瘤基因同源物A抗體 規(guī)格: 0.1ml

MACC1  結(jié)腸轉(zhuǎn)移相關(guān)1抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-BMX/ETK (Tyr40)  磷化非受體性激ETK抗體 規(guī)格: 0.1ml

SCGB3A1  結(jié)合珠家族3A1抗體 規(guī)格: 0.2ml

TRPV1/VR1  辣椒受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

ACSM3  丁?；铣?抗體 規(guī)格: 0.2ml

LECT1  白細(xì)胞衍生化學(xué)吸引抗體 規(guī)格: 0.2ml

DAXX  死亡相關(guān)6抗體(Fas死亡區(qū)相關(guān)) 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Biotin/PE  PE標(biāo)記的兔抗抗體IgG 規(guī)格: 0.1ml

APAF1(NT)  凋亡活性因子-1抗體（N端） 規(guī)格: 0.1ml

ABCA2  三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)2抗體 規(guī)格: 0.2ml

婁地青霉規(guī)格CXC-R2  CXCR2/CD182 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-CDC42 (Ser71)  磷酸化細(xì)胞分化周期CDC42蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Desmocollin 4  橋粒糖蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-Rictor (Thr1135)  磷酸化雷帕靶蛋白復(fù)合體2抗體 規(guī)格: 0.1ml

MASP2  甘露聚糖結(jié)合凝集素肽2抗體 規(guī)格: 0.1ml

PDZD9  PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK9蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Plasminogen  纖維蛋白溶原抗體 規(guī)格: 0.1ml

HIFPH4  缺氧誘導(dǎo)因子脯氨酰4羥化抗體 規(guī)格: 0.2ml

CaMK2 beta/CaMK2 gamma  鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激2b/2γ抗體 規(guī)格: 0.1ml

C15orf52  15號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框52抗體 規(guī)格: 0.2ml

Histone H3 (Di Methyl K4)  二甲基化組蛋白H3K4抗體 規(guī)格: 0.1ml

HNF1/TCF1/HNF1A  肝細(xì)胞核因子1α抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-RAD51(Thr310)  磷酸化Rad51抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-Bovine IgM/Bio  標(biāo)記的兔抗牛IgM 規(guī)格: 0.1ml

IFABP  小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-PIK3R1(Tyr556)  磷酸化磷脂酰肌激抗體 規(guī)格: 0.1ml