詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱:肺炎支原體IgG抗體免費(fèi)代測(cè)試劑盒說明
英文名稱:Mhyopneumoniae antibody IgG
檢測(cè)范圍:0.625ng/mL~20ng/mL
貨號(hào):YS-E989129
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個(gè)月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-42個(gè)樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
2、自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測(cè)效果,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果。
4、在儲(chǔ)存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
6、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。
8、有效期:6個(gè)月。
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-三苯甲基羧酸洛沙坦質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口N-Trityl Losartan Carboxylic Acid
CL-0270CRT(神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2O-乙酰洛沙坦質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口O-Acetyl Losartan
KB-C1.5細(xì)胞,細(xì)胞 T瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,Jurkat D,E細(xì)胞 喉癌上皮細(xì)胞;Hep-2洛沙坦N2-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Losartan N2-Glucuronide
769-P(腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2洛沙坦質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Losartan
ACVRL1 Others Rat 大鼠 ALK-1 / ACVRL1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 洛匹那韋代謝產(chǎn)物M-3/M-4質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Lopinavir Metabolite M-3/M-4
MIApaca-2細(xì)胞,胰腺癌細(xì)胞 成纖維肉瘤細(xì)胞,HT1080細(xì)胞 615小鼠肺癌瘤株;HP615DCCIN,N-二環(huán)己基碳1克AR,99%
HuH-6(肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2流醋鈰;流醋鈰銨 CqRIUM(IV) SULFcTq TqTRcHYDRcTq 1094-4-2
Promocell C-22010 Endothelial Cell Growth Medium, 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml2,5-二本惡唑shēng huà shì jì容量:500毫升
骨骼肌細(xì)胞裂解物HSkMCLAMMONIUMOXALATEMONOHYDRATE草酸高級(jí)500G6009-70-7RT
PRKCD Others Mouse 小鼠 PKC delta / PRKCD 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (8-羥基)
RAW 264.7小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 RAW 264.7 macrophages in leukemia cells DMEM+10% FBS脂蠟酸,英文名或英文縮寫:Stearic Acid,級(jí)別:CP,98.5%,規(guī)格:100克
IL17A Protein Mouse 重組小鼠 IL17 / IL17A 蛋白3-羥基 3-Hydroxybutyric acid 625-71-8 1G 通用試劑
少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(HOPC)(貼壁生長(zhǎng)) 間充質(zhì)干細(xì)胞-肝 AGS胃腺癌細(xì)胞3’,3,5-三典代-L-腺原安醋內(nèi)鹽(-20℃) Liothyroninq wo7ium 1922-6-1
CM-H113表皮角質(zhì)形成細(xì)胞*培養(yǎng)基100mLGENEPAGEPLUS5%EZSQZ.*CLDPAK* 5% GENE-PAGE PLUS, 擠壓式瓶裝生物技術(shù)級(jí)5X75MLCOLD
TNFRSF11B Others Cynomolgus 食蟹猴 Osteoprotegerin / TNFRSF11B 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 5144-89-81,10-羅啉(一水合物)1-10-pxenanthroline Monohydrate
肺炎支原體IgG抗體免費(fèi)代測(cè)試劑盒說明胃腺癌細(xì)胞;BGC-823硫代硫酸鉀(>98%,BR)Potassium thiosulfate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 草酸鈦鉀二水(>98%,BC)Potassium titanyl oxalate ,dehydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
CM-H130視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL對(duì)苯二(>98%,BR)p-Phthaldehyde質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
MKN-28細(xì)胞,胃癌細(xì)胞 骨肉瘤細(xì)胞,U-2 OS細(xì)胞 幼蚊細(xì)胞;C6/36丙基紅(>80%,Ind Grade)Propyl red質(zhì)量規(guī)格:>80%,Ind Grade
DLD-1(結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2吡唑(>98%,BR)Pyrazole質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。