細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),產(chǎn)品名稱貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。
產(chǎn)品名稱:DU 145(人前列腺癌細(xì)胞)
規(guī)格:5×106cells
貨號(hào):YS-02X9584
產(chǎn)品分類:細(xì)胞系
儲(chǔ)存條件2℃-8℃,避光儲(chǔ)存
運(yùn)輸條件冰袋冷藏運(yùn)輸
注意事項(xiàng)
1、使用產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免污染。
2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4、所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5、本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè); 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
1:水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?/span>
2:準(zhǔn)備15mL離心管,并向其中加入適量培養(yǎng)基待用
3:將細(xì)胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出,放入PE手套中,迅速投入水浴鍋
4:用力搖晃凍存管,使其在1分鐘內(nèi)融化
5:用紙巾擦拭水漬,轉(zhuǎn)移至生物安全柜。用移液槍吸取細(xì)胞懸液,緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管
6:1200rpm離心3分鐘
7:棄上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,接種至新的無(wú)菌培養(yǎng)器皿中
鈉氏試劑 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:5ML*2
乙酰胺肉湯 英文名稱:Acetamide broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g
克氏瓊脂 英文名稱:Kligler's Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
金氏B培養(yǎng)基管 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:5ml*20支
CN瓊脂平板 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:9cm*10
UBA培養(yǎng)基 英文名稱:UBA Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
NBB培養(yǎng)基 英文名稱:NBB Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
RaKa-Ray培養(yǎng)基 英文名稱:Raka-Ray Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
1%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基 英文名稱:1% Dextrose Broth Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
錳鹽營(yíng)養(yǎng)瓊脂 英文名稱:Mn2+Nutrient Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
DU 145(人前列腺癌細(xì)胞)537-73-5異阿魏 規(guī)格: 20mg
醋去氨加壓 規(guī)格: 20mg/瓶
78824-30-3山竹子 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
規(guī)格: 1g
細(xì)辛脂 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支;
63-91-2L-丙氨 規(guī)格: HPLC≥98%;200mg
(草珊瑚) 規(guī)格: 2g
611-40-5射干;tectoridin 規(guī)格: 20mg
13063-04-2化兩面針 規(guī)格: 20mg
重組人胰島 規(guī)格: 約20mg/支