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          胰輔脂酶(CLPS)卵白蛋白偶聯(lián)物

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2023-04-12 14:57:00瀏覽次數(shù):371

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 說明書
          應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研實驗
          英文名稱 OVA Conjugated Colipase, Pancreatic (CLPS) 物種 Sus scrofa; Porcine (Pig,豬)
          來源 蛋白偶聯(lián) 應(yīng)用 Cell culture; Activity Assa
          胰輔脂酶(CLPS)卵白蛋白偶聯(lián)物公司正在銷售的產(chǎn)品:IFNG重組雪貂 IFNG / Interferon Gamma 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
          NT-4,NT-5 神經(jīng)生長因子4/5(抗原 0.5mgNT-4,NT-5 神經(jīng)生長因子4/5(抗原)
          TNFRSF9重組人 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
          ATP1B1 Protei

          詳細(xì)介紹

          公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

          產(chǎn)品名稱:胰輔脂酶(CLPS)卵白蛋白偶聯(lián)物

           英文名稱:OVA Conjugated Colipase, Pancreatic (CLPS)

          酶與激酶

          物種:Sus scrofa; Porcine (Pig,豬)

          來源:蛋白偶聯(lián)

          原分子量-

          緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4

          性狀:凍干粉

          純度:>   90%

          等電點:-

          應(yīng)用:Immunogen;   SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg   5mg

           

          樣品要求:

          1、待標(biāo)記樣品需保證90%以上的純度,樣品中不含有干擾標(biāo)記物結(jié)合的成分,如有特殊成分,請?zhí)崆皹?biāo)注說明。

          2、待標(biāo)記樣品最小標(biāo)記量為1mg,最好是干粉,如果是液體,濃度應(yīng)大于1mg/ml。

          3、抗體IgG樣品中應(yīng)不含BSA、疊氮鈉成分。

          4、大分子蛋白應(yīng)提供分子量、等電點、緩沖液成分及pH等信息;小分子多肽需提供氨基酸序列;小分子化合物還需提供分子結(jié)構(gòu)式。

          5、請?zhí)崆罢f明任何特殊情況。
          相關(guān)產(chǎn)品:

          NT-4,NT-5 神經(jīng)生長因子4/5(抗原 0.5mgNT-4,NT-5 神經(jīng)生長因子4/5(抗原)

          ATP1B1 Protein Human 重組人 ATP1B1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

          IFNG重組雪貂 IFNG / Interferon Gamma 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

          SPARCL1 Protein Mouse 重組小鼠 SPARCL1 / SPARC-like 1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

          TNFRSF9重組人 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (His 標(biāo)

          蛋白表達及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

          2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

          4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

          特性

          重組蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式,原核細(xì)胞表達的重組蛋白為凍干粉狀態(tài),真核細(xì)胞表達的重組蛋白為溶液態(tài)保存,這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定,-80條件下可保存數(shù)年。凍干粉在使用前需進行溶解,其中溶解的方法非常關(guān)鍵,因為溶解不好會降低蛋白的效用。溶液態(tài)保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程中也需要仔細(xì)注意,這些都是用戶在實際應(yīng)用中經(jīng)常遇到的問題。

          (1)原核細(xì)胞表達的重組蛋白。Immune tech大腸桿菌表達的凍干重組蛋白,已經(jīng)從包涵體中提純,添加了蛋白保護劑,使用過濾后的無菌水作為復(fù)溶劑即可,復(fù)溶凍干蛋白100 μg,86 μl的超純水,輕輕搖晃使蛋白溶解,再用移液槍的槍頭輕吹幾下即可溶解,一定不能使用渦旋儀進行快速振蕩或劇烈搖晃。

          (2)真核細(xì)胞表達的重組蛋白。有活性的蛋白質(zhì)不僅要轉(zhuǎn)錄和翻譯,還要進行翻譯后的加工,使得蛋白質(zhì)的空間折疊方式維持正常,所以重組蛋白必須在真核細(xì)胞中進行,如哺乳動物細(xì)胞能夠識別和去除基因中的內(nèi)含子,對翻譯后的蛋白質(zhì)進行加工,這樣表達的蛋白質(zhì)具有生物活性。我們用溶液態(tài)來保存,保持了其良好的活性和穩(wěn)定性。

          (3)類固醇還原酶1(SRD5α1)重組蛋白的保護劑。在凍干和儲存過程中常用的保護劑或穩(wěn)定劑有糖類,多元醇,聚合物,表面活性劑,某些蛋白和氨基酸等。我們通常加8%(質(zhì)量比體積)的海藻糖作為凍干保護劑。海藻糖可明顯阻止蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)改變以及凍干過程中蛋白質(zhì)的伸展和聚集,也是一種普遍應(yīng)用的凍干保護劑和填充劑。

          羊布魯氏菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Brucella melitensisPCR 50T

          羊流產(chǎn)沙門氏菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Salmonella abortus ovisPCR 50T

          恙蟲病東方體PCR檢測試劑盒 英文名稱; Orientia tsutsugamushiPCR 50T

          伊麗莎白巴爾通體PCR檢測試劑盒 英文名稱; Bartonella elizabethaePCR 50T

          MDR1(multidrug resistance 1) 多藥耐藥蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

          Anti-beta-Amyloid 1-42(CT) β淀粉樣肽1-42 (C)抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          Rhesus antibody Rh Phospho-BMX/ETK (Tyr556) 0酸化非受體性蛋白酪ETK抗體 規(guī)格 0.1ml

          TBS緩沖液 100ml 0.05mol/L pH 7.6

          Vitronectin 英文名稱: 玻璃粘連蛋白抗體 0.1ml

          phospho-DAB2 (Ser24) 英文名稱: 0酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能0蛋白DAB2抗體 0.1ml

          Anti-beta-Amyloid 1-42(CT) β淀粉樣肽1-42 (C)抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          胰輔脂酶(CLPS)卵白蛋白偶聯(lián)物傳染性胰臟壞死病病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Infectious Pancreatic Necrosis Virus(IPNV)RTPCR

          傳染性軟疣病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Molluscum Contagiosun Virus(MCV)PCR

          傳染性脾腎壞死病病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus(ISKNV )PCR

          傳染性皮下和造血器官壞死病病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Infectious Hyp

          操作步驟:

          實體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2  100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.51 mL Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4離心5 min

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70,避免反復(fù)凍融。

          培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

          細(xì)胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107

          0.5 mL1 mL

          5×106

          0.2 mL0.5 mL

          5.置于4搖床平臺上,溫和振蕩15 min

          6 14,000rpm,4離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70,避免反復(fù)凍融

           


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