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阿留申病病毒PCR檢測(cè)試劑盒操作流程
閱讀：174 發(fā)布時(shí)間：2021-3-3阿留申病病毒PCR檢測(cè)試劑盒操作流程：
1. 根據(jù)要保存的各樣本的體積，計(jì)算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應(yīng)當(dāng)是組織體積的10倍（如100mg組織約用1ml RNAwait）；離心收集2×106細(xì)胞RNAwait的用量是1ml。
2. 將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中；
3. 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀，立即*浸入RNAwait中。組織的厚度一定要<0.5 cm。組織過(guò)厚則RNAwait不能有效滲入，組織中間部位的RNA不能受到保護(hù)。較小的組織（如大鼠的腎臟、脾臟，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存時(shí)先將樣本浸入RNAwait后置4℃冰箱過(guò)夜（4℃過(guò)夜是必需的，這樣可使RNAwait*滲入到組織中），然后轉(zhuǎn)移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃時(shí)仍為液態(tài)，有結(jié)晶析出，是正常情況）；或者在4℃冰箱過(guò)夜后，從RNAwait中取出組織塊，轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的標(biāo)本，反復(fù)凍融至室溫20次不影響RNA的質(zhì)量。
阿留申病病毒PCR檢測(cè)試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶操作步驟