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          技術(shù)文章

          金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒樣本處理及要求

          閱讀:251          發(fā)布時間:2019-6-5

          金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒實驗原理

          試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被金屬硫蛋白(MT)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的金屬硫蛋白(MT)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

          金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒樣本處理及要求

          1.  血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
          2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
          3.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
          注:標本溶血會影響后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

          需要而未提供的試劑和器材

          1.     酶標儀(450nm)

          2.     高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

          3.     37℃恒溫箱

          4.     蒸餾水或去離子水

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