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          上海雅吉生物科技有限公司>>細(xì)胞系/株>>Lwnt-3a小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞系

          Lwnt-3a小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞系

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          • Lwnt-3a小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞系

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          訂貨量 1
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 型號(hào)
          • 品牌 ATCC
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2024-11-08 08:46:19瀏覽次數(shù):310

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 一周 規(guī)格 5×105cells/瓶
          Lwnt-3a小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞系L-M(TK-) cells (ATCC CCL-1.3) 用Wnt-3A表達(dá)載體轉(zhuǎn)染并在含G418的培養(yǎng)基中篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株。 Wnt-3A基因編碼一個(gè)有變異的信號(hào)功效分泌性糖蛋白。 Wnt基因控制胚胎發(fā)過程中的許多模式形成和生長事件。 這些細(xì)胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白。

          詳細(xì)介紹

          Lwnt-3a小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞系背景資料:

          L-M(TK-) cells (ATCC CCL-1.3) 用Wnt-3A表達(dá)載體轉(zhuǎn)染并在含G418的培養(yǎng)基中篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株。 Wnt-3A基因編碼一個(gè)有變異的信號(hào)功效分泌性糖蛋白。 Wnt基因控制胚胎發(fā)過程中的許多模式形成和生長事件。 這些細(xì)胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白。 它們是目前生產(chǎn)Wnt-3A條件培養(yǎng)基的來源。 由于這種條件培養(yǎng)基還包含Wnt-3A蛋白外的其他因子,對于涉及Wnt-3A條件培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)有必要用其來源細(xì)胞株(ATCC CRL-2648)作對照。

          規(guī)格:5×105cells/瓶
          培養(yǎng)條件:37℃,5% CO2,PH值7.2~7.4,無菌恒溫培養(yǎng)。
          細(xì)胞數(shù)量:1× 106個(gè)
          細(xì)胞傳代:1:4~1:6傳代;每周換液2~3次
          細(xì)胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
          細(xì)胞檢測:細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
          培養(yǎng)條件:DMEM(高糖) +10% FBS;37℃,5% CO2
          傳代方法:建議1:2-1:3 兩天換液一次
          凍存條件:90%FBS+10%DMSO
          細(xì)胞凍存:液氮凍存?????

          T25瓶細(xì)胞處理方法

          收到Lwnt-3a小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞系后,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作:

          1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

          2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

          3. 預(yù)熱*培養(yǎng)基(含1%雙抗)。

          4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。

          5. ①若細(xì)胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,進(jìn)行傳代。

          ②若細(xì)胞密度較大,達(dá)到80%以上,將細(xì)胞傳代培養(yǎng)。

          注:

          培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基。由于運(yùn)輸過程中的問題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,這時(shí)請?jiān)谂恼蘸髮腋〉募?xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基。(這里是針對原來*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,如果原來FBS濃度是20%,可以增加到25%FBS濃度)   收到細(xì)胞后如細(xì)胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問題,請當(dāng)天反饋并提供圖片,且保存前三天照片以便分析。7天內(nèi)反饋,細(xì)胞本身問題免費(fèi)重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實(shí)際情況酌情處理;7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,不予免費(fèi)售后。

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