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高效微流電動(dòng)液相色譜系統(tǒng)-萬古霉素固定相分離檢測(cè)手性藥物
1. 背景介紹
毛細(xì)管電色譜（CEC）結(jié)合了毛細(xì)管電泳（CE）和高效液相色譜（HPLC）的較佳特點(diǎn)：CE 的分離效率高，高效液相色譜的多選擇性和大樣本容量。近年來，對(duì)映體的分離受到了廣泛關(guān)注，許多 HPLC 中常見的手性固定相被用在CEC 中，例如環(huán)糊精、纖維素、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素、陰離子交換型固定相和分子印跡聚合物等。然而，當(dāng)在沒有壓力的情況下使用 CEC 時(shí)，特別是對(duì)于填充柱，仍然存在與氣泡形成和柱干涸相關(guān)的問題和困難，在開管和整體柱中不會(huì)出現(xiàn)這個(gè)問題。熔融玻璃管壁似乎是形成氣泡的重要因素。對(duì)于填充柱中出現(xiàn)的氣泡和柱干涸的問題，可以通過高效微流電動(dòng)液相色譜（eHPLC）系統(tǒng)解決， 其流動(dòng)相由壓力流和電滲流（EOF）共同驅(qū)動(dòng)。
在 eHPLC 系統(tǒng)中，可以在毛細(xì)管色譜柱的出口端和進(jìn)口端施加一個(gè)大于 1000 psi 的壓力，這樣就可以避免在使用 CEC 模式時(shí)出現(xiàn)氣泡和柱干涸等問題。同時(shí)，eHPLC 系統(tǒng)中樣品可通過旋轉(zhuǎn)式注射器實(shí)現(xiàn)定量引入。另外，EOF 可以與整個(gè)流動(dòng)相的方向相同或相反，因此可以影響樣品洗脫順序。更重要的是 EOF 適用于梯度洗脫模式。因此，通過eHPLC 系統(tǒng)，CEC 的優(yōu)勢(shì)可以充分的實(shí)現(xiàn)。
我們選取一種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素-萬古霉素作為手性固定相，建立了 eHPLC 系統(tǒng)分離檢測(cè)手性藥物的方法。
2. 測(cè)試條件
| 儀器： | TriSep ®-3000 高效微流電動(dòng)液相色譜系統(tǒng) |
3. 測(cè)試結(jié)果
圖 1 高效微流電動(dòng)液相色譜法（實(shí)線）和毛細(xì)管液相色譜法（虛線）檢測(cè)手性藥物色譜圖
注： a 異丙嗪；b 卡替洛爾； c 塞利洛爾；d 沙丁胺醇
4. 結(jié)論
采用 TriSep ®-3000 高效微流電動(dòng)液相色譜系統(tǒng)，并在有機(jī)相中加入萬古霉素做手性固定相，可實(shí)現(xiàn)異丙嗪、 卡替洛爾、塞利洛爾和沙丁胺醇的分離檢測(cè)。并且得到，在相同的條件下，高效微流電動(dòng)液相色譜法的效率和分辨率高于毛細(xì)管液相色譜法。
5. 配置列表
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儀器配置 | TriSep ®-3000 高效微流電動(dòng)液相色譜系統(tǒng)（配二元梯度泵、柱溫箱、UV 檢測(cè)器、高壓電源、自動(dòng)進(jìn)樣器、微流控、控制器） |
| Clarity Lite 色譜工作站 |