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熒光顯微鏡的原理
閱讀：1722 發(fā)布時(shí)間：2021-8-23
熒光顯微鏡一般都用高強(qiáng)度的汞燈做激發(fā)光源。使用濾色片把不需要的光濾去，只留下激發(fā)熒光集團(tuán)的高強(qiáng)度很純的光線。這個(gè)單色的光線通過(guò)物鏡照射到樣本上之后，樣本會(huì)被激發(fā)出發(fā)射光(熒光)，熒光和激發(fā)光都會(huì)沿著物鏡光路返回，這樣的話，就需要用一個(gè)二相色鏡把激發(fā)光濾去，只讓我們需要看到的熒光透過(guò)。
熒光顯微鏡的應(yīng)用要點(diǎn)
熒光顯微鏡的應(yīng)用要點(diǎn)
熒光顯微鏡是利用“光化熒光”成像，如果所選激發(fā)波長(zhǎng)在肉眼所看不見(jiàn)的近紫外光區(qū)(320～400nm)，熒光的發(fā)射光譜也較普通光鏡光源的平均波長(zhǎng)短，光學(xué)分辨率提高。高能量的光子與電子碰撞，使得電子從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)。激發(fā)態(tài)的電子很不穩(wěn)定，會(huì)重新回落到基態(tài)，這個(gè)過(guò)程中會(huì)消耗部分熱能，并發(fā)出新的光子。新的光子能量比起初的光子能量低，因此波長(zhǎng)更長(zhǎng)。由于新的光子波長(zhǎng)區(qū)別于入射光的光子波長(zhǎng)，通過(guò)一定的光學(xué)處理方法將兩束不同波長(zhǎng)的光分開(kāi)，從而使我們只看到發(fā)射出來(lái)的新光子(熒光信號(hào))，也就是熒光顯微鏡看到的熒光圖像。