產(chǎn)品品牌：ZCIBIO（茁彩生物）

產(chǎn)品名稱：Ala轉(zhuǎn)氨酶/谷丙(ALT/GPT)ELISA試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

應(yīng)用領(lǐng)域：Ala轉(zhuǎn)氨酶/谷丙(ALT/GPT)ELISA試劑盒僅供科研實驗，不得用于臨床診斷。

保存條件：2~8℃，有效期6個月。

產(chǎn)品簡介：

• 預(yù)期應(yīng)用：是一個夾心酶免疫分析法體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)生物液體樣本中的濃度。

需自備的設(shè)備及試劑：

1.450±10nm濾光片酶標(biāo)儀（建議儀器使用前預(yù)熱）

2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.

3.Eppendorf 移液器.

4.蒸餾水或去離子水.

5.脫脂棉吸水紙.

6.37℃恒溫箱.

7.100ml和1000ml量筒.

標(biāo)本的采集與保存：

1.血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.組織勻漿：用預(yù)冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.2-7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織再剪碎。將剪碎的組織不對應(yīng)體積的 PBS（一般按 1:9 的重量體積比，比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9mL 的 PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記彔。推薦在 PBS 中加入蛋白酶抑制劑）加入玱璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復(fù)凍融。將勻漿液于 5000×g 離心 5~10 分鐘，取上清檢測。

4.細(xì)胞培養(yǎng)上清或其他生物標(biāo)本：

請 1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注意:

1.以上標(biāo)本均需密封保存，4℃保存應(yīng)小于一周，-20℃ 不應(yīng)超過1個月，-80℃保存可放置更久。

2.標(biāo)本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫，不應(yīng)加熱使之溶解。

3.標(biāo)本溶血會影響檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進行此項檢測。

標(biāo)本說明：

1.本公司只對試劑盒本身負(fù)責(zé)，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé)，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預(yù)留充足的樣本。

2.實驗前應(yīng)預(yù)測標(biāo)本含量，如果標(biāo)本濃度過高，應(yīng)對標(biāo)本進行稀釋，使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進行預(yù)實驗驗證其有效性，并注意留存樣本。

4.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實驗結(jié)果偏差。

5.若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時間等，所以可能存在檢測不出的情況。

6.某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因為產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。

7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

實驗原理：

• 將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入微生物化的目標(biāo)抗體，將未結(jié)合的抗體洗凈后，加入HRP標(biāo)記和親和素，再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計算樣品濃度。

精密度：

• 精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV（%）=SD/mean×100

• 批內(nèi)差：取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測，每份樣本連續(xù)測定20次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。

• 批間差：選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本定量測定，每個樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。

• 批內(nèi)差: CV<10% Inter-批間差: CV<13%

警告：

• 本試劑盒中使用了稀硫酸作為終止液，其具有輕微腐蝕性，使用時應(yīng)避免接觸衣物或眼、手等皮膚暴露部位。

• 友情提醒：試劑盒使用完畢后，請妥善處理相關(guān)耗材，避免環(huán)境污染！

• 提供免費代測服務(wù)，上海茁彩生物科技有限公司專注酶聯(lián)免疫，專注ELISA，期待您的來電！