壓力蒸汽滅菌生物指示劑的原理主要基于特定細(xì)菌芽孢對(duì)壓力蒸汽的耐受性以及芽孢復(fù)蘇后的生長(zhǎng)特性來(lái)判斷滅菌效果,具體如下:
細(xì)菌芽孢的選擇:壓力蒸汽滅菌生物指示劑中通常含有嗜熱脂肪桿菌芽孢(ATCC7953)等13。細(xì)菌在不良環(huán)境條件下會(huì)形成芽孢,芽孢具有很強(qiáng)的耐熱性、耐干燥性和耐化學(xué)性等,能夠在極duan環(huán)境下生存。在壓力蒸汽滅菌過(guò)程中,如果滅菌條件不達(dá)標(biāo),這些芽孢就有可能存活下來(lái)。
滅菌過(guò)程中的挑戰(zhàn):當(dāng)把含有細(xì)菌芽孢的生物指示劑與待滅菌物品一起放入壓力蒸汽滅菌器時(shí),滅菌器內(nèi)的高溫高壓環(huán)境會(huì)對(duì)細(xì)菌芽孢產(chǎn)生作用。在設(shè)定的滅菌溫度(如 121℃或 134℃)和時(shí)間下,理論上可以殺死絕大部分的微生物。然而,如果滅菌器出現(xiàn)故障、操作不當(dāng)或者滅菌條件未達(dá)到要求,細(xì)菌芽孢就可能沒有被完quan殺滅3。
培養(yǎng)后的判斷:
陰性結(jié)果判斷:滅菌結(jié)束后,將生物指示劑取出進(jìn)行培養(yǎng)。如果滅菌過(guò)程有效,細(xì)菌芽孢會(huì)被徹di殺滅,在適宜的培養(yǎng)條件下不會(huì)有細(xì)菌生長(zhǎng),培養(yǎng)液的顏色等指標(biāo)不會(huì)發(fā)生變化,通常會(huì)保持初始的顏色或狀態(tài),這就表明滅菌合格。
陽(yáng)性結(jié)果判斷:如果滅菌不完quan,細(xì)菌芽孢在培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)復(fù)蘇并開始生長(zhǎng)繁殖。芽孢復(fù)蘇后,細(xì)菌會(huì)進(jìn)行新陳代謝,產(chǎn)生各種代謝產(chǎn)物,這些代謝產(chǎn)物會(huì)改變培養(yǎng)液的酸堿度等性質(zhì)。例如,代謝產(chǎn)生的酸會(huì)使培養(yǎng)液的 pH 值降低,從而觸發(fā)培養(yǎng)液中酸堿指示劑的顏色變化,提示滅菌不合格。
總之,壓力蒸汽滅菌生物指示劑通過(guò)模擬滅菌過(guò)程中最難以殺滅的微生物情況,利用細(xì)菌芽孢的特性和培養(yǎng)后的生長(zhǎng)表現(xiàn),來(lái)直觀地反映壓力蒸汽滅菌的效果是否達(dá)到了預(yù)期的無(wú)菌要求。