詳細介紹
預期用途
RSR 公司生產(chǎn)的甲狀腺過氧化物酶自身抗體(TPO Ab) RIA 檢測試劑盒僅用于定量檢測人類血清中甲狀腺過氧化物酶抗體。需專業(yè)技術(shù)人員操作。甲狀腺過氧化物酶(TPO)抗體與甲狀腺球蛋白(Tg)抗體的產(chǎn)生與甲狀腺的自身免疫性損傷有關(guān)。這些抗體的檢測在甲狀腺自身免疫疾病診斷及治療中具有重要的價值。
檢測原理
在RSR 的甲狀腺過氧化物酶抗體RIA 檢測方法中,標準品和稀釋后的血清在*步孵育中先與碘125 標記的TPO 結(jié)合,一小時后在第二步中與加入的固相蛋白A 結(jié)合,使已形成的碘標記抗原抗體復合物產(chǎn)生沉淀。一小時孵育后加入緩沖液,經(jīng)離心及棄去上清液后可去除未結(jié)合的標記抗原。經(jīng)測定沉淀中碘125 的放射量可測得沉淀中胰島素抗體的濃度。
實驗步驟
所有試劑除緩沖液外使用前需室溫放置(20-25℃)至少30 分鐘;所有試劑使
用前請混勻。
1.所有血樣請按1:20 使用緩沖液(C)稀釋。例如50μL 血清稀釋至1mL。請勿稀
釋標準品。
2.各自向做好標記的測定管中加入50μL 患者血清和標準品。實驗推薦進行雙管。
3.每支管中加入50μL 碘125 標記的TPO。準備兩只額外的空管,向其中加入標
記TPO 用以測定總計數(shù)。
4.蓋好測定管,使用渦旋攪拌器混勻每支測定管,在室溫下孵育一小時。
5.每支管中加入50μL 蛋白A。(總計數(shù)測定管除外)
6.重復步驟4.
7.每支管加入1mL 緩沖液(總計數(shù)測定管除外),混勻后在4℃下使用冷凍離心機
1500g 離心30 分鐘。
8.棄去上清液。使用gamma 計數(shù)器測量每支管(含總計數(shù)測定管)余下的沉淀中碘
125 的放射量,測量一分鐘。