詳細(xì)介紹
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下
產(chǎn)品名稱 | 通用進(jìn)口PCR試劑 |
英文名稱 | LentivirusRTPCR |
分類 | PCR檢測(cè)試劑盒 |
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
皮生長(zhǎng)因子受體抗體 REN ELISA Kit 腎素(REN)ELISA試劑盒
Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體 AMR ELISA Kit 腎上腺髓質(zhì)素受體(AMR)ELISA試劑盒
早期B淋巴細(xì)胞因子1抗體 ADM2 ELISA Kit 腎上腺髓質(zhì)素2(ADM2)ELISA試劑盒
內(nèi)皮素受體A抗體 ADRα2C ELISA Kit 腎上腺素能受體α2C(ADRα2C)ELISA試劑盒
表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 ADRα1A ELISA Kit 腎上腺素能受體α1A(ADRα1A)ELISA試劑盒
表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 WT1 ELISA Kit 腎母細(xì)胞瘤蛋白1(WT1)ELISA試劑盒
早期生長(zhǎng)應(yīng)答蛋白1抗體 RNLS ELISA Kit 腎酶(RNLS)ELISA試劑盒
表皮膜蛋白1抗體 NPNT ELISA Kit 腎連蛋白(NPNT)ELISA試劑盒
內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪氨酸激酶A抗體 NPHP4 ELISA Kit 腎結(jié)核蛋白4(NPHP4)ELISA試劑盒
酪氨酸蛋白激酶A4抗體 CLK
NFAT5)ELISA Kit Rat nuclear factor of activated T-cells 5,NFAT5 ELISA Kit
大鼠Toll樣受體9(TLR9)ELISA Kit Rat Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA kit
大鼠Toll樣受體7(TLR-7)ELISA Kit Rat toll-like receptor 7,TLR-7 ELISA Kit
大鼠toll樣受體3(TLR3)ELISA Kit Rat toll-like receptor 3,TLR3 ELISA kit
大鼠toll樣受體1(TLR1)ELISA Kit Rat toll-like receptor 1,TLR1 ELISA kit
通用進(jìn)口PCR試劑大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA Kit Rat TGF-beta-inducible early response gene-1,TIEG1 ELISA Kit
1 ELISA Kit 腎膠原凝集素1(CLK1)ELISA試劑盒
前列腺素E受體3抗體 NPHP7 ELISA Kit 腎胱素7(NPHP7)ELISA試劑盒
雌激素受體α抗體 NPHP5 ELISA Kit
Q-PCR技術(shù):
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記物,利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過擴(kuò)增曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。熒光定量PCR不僅實(shí)現(xiàn)真正實(shí)現(xiàn)了定量,而且具有靈敏度和特異性、高能實(shí)現(xiàn)多重反應(yīng)、自動(dòng)化程度高、無污染、實(shí)時(shí)和準(zhǔn)確等特點(diǎn)。
熒光定量PCR所使用的熒光基團(tuán)可分為兩種:熒光探針和熒光染料。
1.使用SYBR熒光染料法來進(jìn)行熒光定量PCR時(shí),我們首先在PCR反應(yīng)體系中加入過量SYBR熒光染料。SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后發(fā)射一定量的熒光信號(hào),而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射熒光信號(hào),從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
2.Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結(jié)合的特點(diǎn),以及探針內(nèi)熒光報(bào)告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)的分子特性來實(shí)現(xiàn)對(duì)PCR進(jìn)行定量檢測(cè)。這種方法可以實(shí)現(xiàn)高靈敏度,嚴(yán)格針對(duì)特定堿基序列的定量實(shí)驗(yàn)。