詳細介紹
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下
產(chǎn)品名稱 | 豚鼠耳炎諾卡菌PCR試劑盒哪家好 |
英文名稱 | Nocardia otitidiscaviarumPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
分化相關(guān)基因蛋白抗體 SCGB2A2 ELISA Kit 分泌球蛋白家族2A成員2(SCGB2A2)ELISA試劑盒
同源異型盒基因HOXA13抗體 SCG5 ELISA Kit 分泌粒蛋白Ⅴ(SCG5)ELISA試劑盒
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磷酸化組蛋白去乙?;?抗體 SECTM1 ELISA Kit 分泌跨膜蛋白1(SECTM1)ELISA試劑盒
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HOOK1蛋白抗體 SCRN1 ELISA Kit 分離蛋白1(SCRN1)ELISA試劑盒
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人類免疫缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp41+gp160抗體 SNX8 ELISA Kit 分揀連接蛋白8(SNX8)ELISA試劑盒
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20號染色體開放閱讀框79抗體 HTGL ELISA Kit 肝臟甘油三脂脂肪酶(HTGL)ELISA試劑盒
20號染色體開放閱讀框94抗體 L-FABP ELISA Kit 肝型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)ELISA試劑盒
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22號染色體開放閱讀框15抗體 HGF ELISA Kit 肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒
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22號染色體開放閱讀框26抗體 HB-EGF ELISA Kit 肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒
補體C2b鏈多肽抗體 HBEGF ELISA Kit 肝素結(jié)合EGF樣生長因子(HBEGF)ELISA試劑盒
2號染色體開放閱讀框16抗體 HCⅡ ELISA Kit 肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒
2號染色體開放閱讀框27抗體 PHC ELISA Kit 肝癌抗原(PHC)ELISA試劑盒
豚鼠耳炎諾卡菌PCR試劑盒哪家好磷酸化δ連環(huán)蛋白抗體 LXRβ ELISA Kit 肝X受體β(LXRβ)ELISA試劑盒
磷酸化δ連環(huán)蛋白抗體 L
HCG3蛋白抗體 SNX7 ELISA Kit 分揀連接蛋白7(SNX7)ELISA試劑盒
HER4抗體 SNX6 ELISA Kit
Q-PCR技術(shù):
實時熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標記物,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過擴增曲線對未知模板進行定量分析的方法。熒光定量PCR不僅實現(xiàn)真正實現(xiàn)了定量,而且具有靈敏度和特異性、高能實現(xiàn)多重反應(yīng)、自動化程度高、無污染、實時和準確等特點。
熒光定量PCR所使用的熒光基團可分為兩種:熒光探針和熒光染料。
1.使用SYBR熒光染料法來進行熒光定量PCR時,我們首先在PCR反應(yīng)體系中加入過量SYBR熒光染料。SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后發(fā)射一定量的熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
2.Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結(jié)合的特點,以及探針內(nèi)熒光報告基團和淬滅基團的分子特性來實現(xiàn)對PCR進行定量檢測。這種方法可以實現(xiàn)高靈敏度,嚴格針對特定堿基序列的定量實驗。