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          伴放線放線桿菌PCR檢測試劑盒

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          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時間:2023-02-28 11:34:04瀏覽次數(shù):133

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
          應用領域 化工 主要用途 僅供科研實驗
          英文名稱 Actinobacillus actinomycetemcomitansPCR 規(guī)格 50T
          伴放線放線桿菌PCR檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:伯氏立克次氏體柯克斯體PCR檢測試劑盒
          柯薩奇病毒型變種PCR檢測試劑盒
          克里米亞剛果出血熱病毒PCR檢測試劑盒
          刺激隱核蟲PCR檢測試劑盒

          詳細介紹

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          百日咳波氏桿菌PCR檢測試劑盒
          操作流程
          收集基因信息——>設計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實物保存。

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          產(chǎn)品名稱

          英文名稱

          規(guī)格

          伴放線放線桿菌PCR檢測試劑盒

          Actinobacillus actinomycetemcomitansPCR

          50T

          PCR實驗方法步驟:
          方法
          1
          :在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer
          5 μl     dNTP mix
          2mM
          4 μl    
          引物110pM
          2 μl    
          引物210pM
          2 μl     Taq
          酶 (2U/μl
          1 μl     DNA
          模板(50ng-1μg/μl
          1 μl      
          ddH2O 50 μl
          PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2
          :調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93
          預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在727min。
          3
          :伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4
          待電泳檢測或-20長期保存。
          4
          PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

          實時熒光定量PCR
          實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標準曲線獲得定量結(jié)果。因此,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎之上的:
          1
          Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,得到的Ct值是恒定的。
          2
          Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
          外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現(xiàn)性定量方法,已得到,廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。
          定量PCR方法:
          a、競爭法
          選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
          b
          、內(nèi)參照法
          在不同的PCR反應管中加入已定量的內(nèi)標和引物,內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
          c
          、PCRELISA
          利用di高辛等標記引物,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合,再加入抗di高辛酶標抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCRELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標,作出標準曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的。

          操作流程:
          1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4。
          2.
          設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
          3.
          樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
          4.
          除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37
          水浴鍋或恒溫箱溫育60min
          5.
          棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
          6.
          每孔加入底物A、B50μL,37
          避光孵育15min產(chǎn)品僅用于科研實驗
          7.
          每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

          下列是公司正在銷售的產(chǎn)品:
          (S)-4-Methoxydalbergione  中文名:(S)-4-甲氧基黃檀醌  分子式:C16H14O3  度:98.0%  兔乙酰(ACh)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

          Dehydroherbarin  中文名:  分子式:C16H14O5  度:96.0%  兔合成酶(NOS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

          Herbarin  中文名:  分子式:C16H16O6  度:97.0%  兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

          Colelomycerone A  中文名:  分子式:C17H18O6  度:98.0%  兔血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

          Herbaridine B  中文名:  分子式:C17H20O6  度:%  兔胰島素樣生長因子1(rabbit IGF-1)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝

          105496-31-9  Fmoc-Glycinol  5g  Duck Tambusu VirusTMUV)鴨坦布蘇病毒RT-PCR試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒

          105500-09-2  8(R)-HETE  100&#956;g  Feline Calicivirus(FCV)貓杯狀病毒前病毒探針法熒光定量PCR試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒

          105500-09-2  8(R)-HETE  25&#956;g  Feline Calicivirus(FCV)貓杯狀病毒前病毒LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒

          105500-09-2  8(R)-HETE  50&#956;g  Feline Calicivirus(FCV)貓杯狀病毒前病毒探針法熒光定量PCR試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒

          10550-58-0  3-O-Hexadecyl-sn-glycerol  1g  Feline Calicivirus(FCV)貓杯狀病毒前病毒染料法熒光定量PCR試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒
          伴放線放線桿菌PCR檢測試劑盒10308-13-1  Cryogenine  5mg  Herba lycopodii伸筋草PCR鑒定試劑盒 

          10308-13-1  Cryogenine  10mg  Herba lycopodii伸筋草PCR鑒定試劑盒 

          1030846-42-4  AS 2034178  10mg  Moschus麝香PCR鑒定試劑盒 

          1030846-42-4  AS 2034178  50mg  Moschus麝香PCR鑒定試劑盒 

          1030937-27-9  Losartan D4  1mg  Fructus cnidii蛇床子PCR鑒定試劑盒

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