詳細介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進行Real Time PCR擴增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時,提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高、特異性擴增能力強、錯配率低等優(yōu)點。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴增,提高PCR的準確性。
中文名稱:芝麻源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:詳見說明書
貨號:GOY-M4735
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,且重復性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時,只需將適當?shù)牧呀饣旌弦?、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細胞:5×106動植物,酵母細胞或細菌細胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
IEC-6/大鼠小腸上皮細胞Recombinant Acid Phosphatase 1 (ACP1)綿羊褪黑素(MT)ELISA Kit
HT-29全細胞裂解液Recombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)綿羊銅藍蛋白(CP)ELISA Kit
HT-29/大腸癌細胞Recombinant Myeloperoxidase (MPO)綿羊甜菜堿-同型半胱氨酸S-基轉(zhuǎn)移酶1(BHMT)ELISA Kit
HL-60/急性髓性白血病細胞Recombinant Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein (MOG)綿羊髓過氧化物酶(MPO)ELISA Kit
His標簽蛋白裂解液Recombinant Fatty Acid Binding Protein 8, Myelin (FABP8)綿羊雙睪酮(DHT)ELISA Kit
HepG2/肝癌細胞Recombinant Triggering Receptor Expressed On Myeloid Cells 1 (TREM1)綿羊生長激素(GH)ELISA Kit
HeLa全細胞裂解液Recombinant Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2 (MPIF2)綿羊三碘狀腺原氨酸(T3)ELISA Kit
HeLa/宮頸癌細胞Recombinant Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP)綿羊溶菌酶(LZM)ELISA Kit
HCT-8全細胞裂解液Recombinant Peptidase D (PEPD)綿羊熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA Kit
HCT-8/結(jié)腸癌細胞Recombinant Peptidase Inhibitor 16 (PI16)綿羊皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA Kit
HCT116全細胞裂解液Recombinant Carbonic Anhydrase I (CA1)綿羊皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA Kit
HCT116/人結(jié)腸癌細胞Recombinant Glycoprotein 130 (gp130)綿羊內(nèi)皮素1受體(EDNRA)ELISA Kit
HCG803全細胞裂解液Recombinant Glycoprotein V, Platelet (GP5)綿羊繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA Kit2-Methylimidazole Amberlite XAD4離子交換大孔吸附樹脂
Ethyl vinyl etherChicken Fcγ (Fc Fragment of IgG) ELISA Kit
芝麻源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒2-Methylpropene;Isobutene; Isobutylene;1,1-DiMethylethylene 正基苯酞;基酞內(nèi)酯
VINYLACETIC ACIDChicken TD-Ag (Thymus Dependent Antigen) ELISA Kit
2-Methylthiophene 腸道菌增菌肉湯(EE)
ALLYLPHOSPHONIC DICHLORIDEChicken CGα (Chorionic Gonadotropin Alpha Polypeptide) ELISA Kit
2-NITROPHENYL OCTYL ETHER 大孔吸附樹脂D101
VANADIUM(III) ACETYLACETONATEChicken KERA (Keratocan) ELISA Kit
2-Nitropropane;β-Nitropropane 澳洲茄胺
ChroMiuM(III) acetylacetonateChicken AIF (Apoptosis Inducing Factor) ELISA Kit
2-tert-Butyl-4-hydroxyanisole D-201高等級大孔強堿Ⅰ型陰離子交換樹脂
Bis(2,4-pentanediono)nickelChicken β Manase ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標準曲線法簡介
公式:
優(yōu)點:分析簡單,實驗優(yōu)化簡單產(chǎn)品僅用于科研
缺點:對每一個基因,每一輪實驗都必需做標準曲線;必需有固定的標準品做標準曲線;這些標準品并不代表樣品擴增的真實狀態(tài)應(yīng)用:基因表達調(diào)控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。