花粉活力染色液(I-KI法)公司正在出售的產(chǎn)品：NF-66/a-Internexin/FITC 熒光標(biāo)記α-中連蛋白抗體IgG吡咯 99%
NFAM1/CNAIP/FITC 熒光標(biāo)記NFAM1抗體IgG吡咯烷 99%
NFATc1/FITC 熒光標(biāo)記活化T核因子1蛋白抗體IgG葡萄糖 AR
NFBD1/MDC1/FITC 熒光標(biāo)記DNA損傷關(guān)卡蛋白1抗體IgG葡萄糖 CP
p-NFATc2

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

釀酒酵母腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體Human EFCAB14(EF-hand calcium-binding domain-containing protein 14) ELISA Kit小鼠羥甲基戊二單酰(HMG-CoA)免疫試劑盒

大腸埃希菌去整合樣金屬蛋白19抗體Human KDM2A ELISA Kit小鼠羥脯(Hyp)免疫試劑盒

紅色紅曲霉原癌基因AF4蛋白抗體Human KCNJ5 ELISA Kit小鼠前心鈉肽(Pro-ANP)免疫試劑盒

黑曲霉整合樣金屬蛋白與凝血樣1蛋白抗體Human KCNJ15 ELISA Kit小鼠前列腺特異性抗原(PSA)免疫試劑盒

貝萊斯芽胞桿菌整合樣金屬蛋白與凝血樣2蛋白抗體Human KCNJ3 ELISA Kit小鼠前列腺性磷(PAP)免疫試劑盒

新疆溶桿菌整合樣金屬蛋白與凝血樣3蛋白抗體Human KCNJ1 ELISA Kit小鼠前列腺G/H合1(PTGS1)免疫試劑盒

黑木耳去整合樣金屬蛋白20抗體Human KCNK18 ELISA Kit小鼠前列腺F(PGF)免疫試劑盒

擬青霉去整合樣金屬蛋白23抗體Human KCNN3 ELISA Kit小鼠前列腺E2合成(PGES)免疫試劑盒

堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌去整合樣金屬蛋白28抗體Human KCNK5 ELISA Kit小鼠前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒

皺環(huán)球蓋菇去整合樣金屬蛋白32抗體Human KCNN4 ELISA Kit小鼠前列腺E1(PGE1)

米蘭鏈霉菌整合樣金屬蛋白與凝血樣4蛋白抗體Human KCNN1 ELISA Kit小鼠前列腺D2(PGD2)免疫試劑盒

規(guī)則東方喜鹽菌膜粘連蛋白9抗體Human KCNV1 ELISA Kit小鼠前列環(huán)(PGI2)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌整合樣金屬蛋白與凝血15型抗體Human KCNQ1DN ELISA Kit小鼠前白蛋白(PA)免疫試劑盒

白酒  鉛 整合樣金屬蛋白與凝血2型抗體Human KCNH7 ELISA Kit小鼠葡萄糖依賴性胰島釋放多肽(GIP)免疫試劑盒

釀酒酵母整合樣金屬蛋白與凝血8型抗體Human KCTD12 ELISA Kit小鼠葡萄糖激(GCK)免疫試劑盒

玫瑰淡紫鏈霉菌整合樣金屬蛋白與凝血9型抗體Human KCNS2 ELISA Kit小鼠葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)免疫試劑盒

獨(dú)島棲海桿菌Maribacter│dokdonensis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR白介2可溶性受體α鏈試劑盒香蘭

擬諾卡氏菌Nocardiopsis│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR白介29試劑盒消旋山莨菪堿

葡萄座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR白介28B試劑盒衛(wèi)矛
花粉活力染色液(I-KI法)林生蠟?zāi)?/span> 1-乙基-3-氟苯可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體Elisa

具核梭桿聚核亞種 4-丁醋酸酯雌受體相關(guān)受體αElisa

毛木耳（臺(tái)耳） 6-甲基煙酰脫2Elisa

藤倉鐮孢 2-巰基-4-甲基嘧啶鹽酸鹽2,3-雙加氧1Elisa

枯草芽孢桿 2-溴-4-尼克酰腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化1Elisa

糞腸球 3-羰基-環(huán)丁烷甲酸甲酯肌苷酸Elisa

尿八疊球 3-(甲基)吡啶鹽酸鹽血清肌酸酐Elisa

類諾卡氏屬 4-氨基-5-甲氧基嘧啶乳酸脫氫Elisa

馬里斯棒狀桿 2,5-二氟苯乙血管緊張轉(zhuǎn)化1Elisa

馬賽 環(huán)甲酰肼飽和磷脂酰Elisa

頭花革 2-(硫代甲基）乙鹽酸鹽卵磷脂Elisa

枯草芽胞桿 順式-六氫異鹽酸鹽膠原IElisa

釀酒酵母 1-甲基-2-吡啶酮膜聯(lián)蛋白-A1Elisa

釀酒酵母 鄰溴苯前列腺G;H合2Elisa

山茶 肼基乙酸乙酯鹽酸鹽N-連接N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移Elisa