商品介紹:
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)染色試劑盒是利用E系列探針進行內(nèi)質(zhì)網(wǎng)特異性染色的試劑盒。本試劑盒中的E01內(nèi)質(zhì)網(wǎng)染色探針為藍色熒光標記的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)探針,具有373/430nm的大激發(fā)/發(fā)射波長。 E系列探針是一種細胞滲透型的對活細胞中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)體進行選擇性染色的一類新型熒光染料,該系列探針可以選擇性標記內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。只需簡單孵育細胞,即可穿過細胞膜并直接聚集在活性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上。可有效標記活細胞。一旦內(nèi)質(zhì)網(wǎng)被染色后,還能根據(jù)后續(xù)實驗的需求進行固定(醛類固定劑如)和透化(醛類去污劑如Triton X-100),探針依然維持在細胞內(nèi)。 E系列內(nèi)質(zhì)網(wǎng)探針具有多種顏色可以選擇,可根據(jù)情況對樣品進行多色標記實驗。除了本試劑盒的紅色熒光探針,我公司還可以提供綠色、紅色等顏色的染色試劑盒。 儲存條件:染料-20℃避光保存;避免反復凍融;稀釋液2-8℃保存。 有效期:6個月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:內(nèi)質(zhì)網(wǎng)染色試劑盒(藍色熒光)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:125T|250T
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
金松雙黃(標準品)英文名稱: Benzyl acetateG蛋白偶聯(lián)受體18抗體包裝5g
金鐵鎖(標準品)英文名稱: Bensulfuron-methylG蛋白偶聯(lián)受體65抗體包裝100ml
金銀花(標準品)英文名稱: Benazolin-ethyl ester生長終止特異性同源盒基因抗體包裝500ml
金櫻根(標準品)英文名稱: 3,4-Benzopyrene谷受體2抗體包裝100g
金櫻子(標準品)英文名稱: (±)-1,3-Butanediol谷受體3抗體包裝25g
金盞銀盤(標準品)英文名稱: Butachlor solution谷受體4抗體包裝500g
筋骨草甾C英文名稱: Butachlor促代謝型谷受體1抗體包裝1g
錦燈籠(標準品)英文名稱: Butachlor solution甘受體α4抗體包裝250mg
京大戟(標準品)英文名稱: Butachlor solution生長分化因子8抗體包裝50mg
京尼平(標準品)英文名稱: Buturon磷化糖原合激-3β抗體包裝1g
京尼平甙(標準品)英文名稱: Bromopropylate solutionGlu-Glu tag抗體包裝25g
京尼平苷(標準品)英文名稱: Bromopropylate solution胰高血糖樣肽-2抗體包裝5g
荊芥(標準品)英文名稱: Bronopol甘受體alpha 1/2/3型抗體包裝250mg
荊芥穗(標準品)英文名稱: Benfluralin抑制型G蛋白α3抗體包裝25g
九里香(標準品)英文名稱: Benzo(k)fluoranthene促性腺激釋放激受體抗體包裝5g
腐皮鐮孢Fusarium│solani 質(zhì)量規(guī)格:>98%,培養(yǎng)級趨化因子配體17試劑盒?;蛆Z去氧膽 ;Taurochenod
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR趨化因子26試劑盒牛血清白蛋白;Bovine albumi
貝倫格葡萄座腔菌梨生?;?/span>Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品趨化因子2試劑盒耐斯糖;Nystose
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)染色試劑盒(藍色熒光)膠胞 3-喹啉成纖維生長因子4Elisa
美濃鏈霉 4,4′-雙[(4-溴苯基)苯氨基]聯(lián)苯突觸標記蛋白7Elisa
細黃鏈霉 2-甲氧基-5-磺酰甲酯熱穩(wěn)定抗原Elisa
水生鞘氨單胞 Tris(dimethylphenylphosphine)](2,5-norbornadiene)r二十二碳六烯酸Elisa
球孢白僵 1,1-聯(lián)苯-4-基-1-丁鹽酸鹽抗類固生成抗體Elisa
鏈霉 2,3-二氯苯乙全轉(zhuǎn)運谷氨酸Elisa
米曲霉 2,5-二基溴化鎂 (1M THF溶液)C-C趨化因子受體6Elisa
水生屈曲桿 N6-苯甲?;?脫氧腺苷白酯Elisa
大孢子鏈霉 十乙二單甲15s-羥化二十碳四烯酸Elisa
Winogradskyella damuponensis 1H-吡咯并(2,3-d)嘧啶幾丁質(zhì)1Elisa
茶云紋葉枯病 4-苯甲酰基苯酸纖維蛋白原βElisa
輪枝(大豆胞囊線蟲卵寄生真) 氯烯鎂β抑制蛋白1Elisa
粘蓋牛肝* 直接紅80維甲酸誘導基因1蛋白Elisa
巴斯德畢赤酵母 9-苯基-9-芴病誘導信號適配蛋白Elisa
釀酒酵母 Thionin perchlorateB-κ-輕肽基因增強子抑制因子激βElisa