產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Luxol Fast Blue髓鞘染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:3×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
用途: 又稱監(jiān)牢藍(lán)髓鞘染色,石蠟切片 注意事項(xiàng): 分化步驟很重要,染色結(jié)果為:髓鞘呈藍(lán)綠色,細(xì)胞核呈紅色。 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小豆蔻明(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Jolkinolide B乙?;D(zhuǎn)移10抗體包裝1g
小茴香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Liquidambaric lactone絲/蘇蛋白激Nek7抗體包裝25g
小薊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Glycerine trioleate神經(jīng)正五聚體1抗體包裝5g
小秦艽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Vinblastine煙酰核苷轉(zhuǎn)氫抗體包裝100g
小葉榕(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Vinblastine利鈉肽受體B抗體包裝25g
纈草三酯英文名稱: Anhydrovinblastine利鈉肽受體C抗體包裝100g
薤白(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Vincristine磷化谷受體2B抗體包裝25g
辛弗林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sparteine sulfate磷化谷受體2B抗體包裝100ml
辛弗林鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: LappaconitineNADPH氧化2抗體包裝25ml
辛辣內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: LycopeneNADPH氧化活化蛋白1抗體包裝100g
辛夷(望春花)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Orcinol glucosid磷化核因子抗體包裝25g
辛夷脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Liriope muscari baily saponins C磷化核因子抗體包裝1g
新補(bǔ)骨脂異黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ardisiacrispin A磷化核因子抗體包裝5g
新橙皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pectolinarigenin磷化核因子抗體包裝1g
新橙皮苷二氫查爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Polygalasaponin F神經(jīng)上皮轉(zhuǎn)化基因1抗體包裝25g
CCTCCAB209161=KACC14537資源名稱: 北極嗜冷居菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%金屬硫蛋白試劑盒醋戊曲酯 ;Acevaltrate
荷氏科爾韋爾氏菌Colwellia│hornerae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于培養(yǎng)解整合樣金屬蛋白9試劑盒臭椿 ;Ailanthone
白假絲酵母Candida│albicans 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品解整合樣金屬蛋白8試劑盒草質(zhì);Herbacetin
Luxol Fast Blue髓鞘染色液白曲霉 2--6-苯基煙絲氨酸;蘇氨酸蛋白激B-rafElisa
黑曲霉 3,5-二甲基-4-松弛Elisa
紅靈芝 2-氨基-3-羥基吡松弛肽;松弛Elisa
米曲霉 3-氨基-4-乙基吡唑草酸鹽酸性成纖維生長(zhǎng)因子Elisa
干酪乳桿 4-基四氫吡喃酸性磷酸Elisa
屎腸球 鄰三氟甲氧苯髓過氧化物Elisa
大豆慢生根瘤 3-溴-5-髓磷脂堿性蛋白Elisa
皮爾瑞俄類芽孢桿 3,5-二氧代環(huán)己烷羧酸髓樣分化蛋白-2Elisa
苜蓿中華根瘤 4,6-二-1H-吡唑并[3,4-D]嘧啶羧化不全骨鈣Elisa
多殺性巴氏桿 4'--2',5'-二甲氧基-N-(3-羥基-2-萘甲?;?苯羧甲基賴氨酸Elisa
鐮刀 6-尿嘧啶胎盤生長(zhǎng)因子Elisa
黃曲霉* 氟米龍?zhí)蔷厶荅lisa
*灰葡萄孢 4-氨基-3-硝基喹啉糖化白蛋白Elisa
漫游孢囊屬 4,5-二氟-2-甲氧基糖化蛋白Elisa
枯草芽孢桿 B (S)-羥基戊酸甲酯糖化血紅蛋白Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)