詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:細胞存活率檢測試劑盒
英文名稱:
產品規(guī)格:100T
發(fā)貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
細胞存活率檢測試劑盒是通過檢測細胞膜的完整性來檢測細胞的存活率。通常情況下細胞膜喪失即可認為細胞研究死亡,本試劑盒中染料不能使正常健康保持完整細胞膜的細胞染色,而可以使細胞膜不完整的細胞染色,通過顯微鏡下直接計數(shù)拍照后計數(shù),就可以對細胞存活率進行精確的定量。 儲存條件:2-8℃避光保存。 有效期:一年。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
尼達明英文名稱: Carisoprodol緊密連接蛋白8抗體包裝1g
洛莫司汀英文名稱: Carisoprodol磷化半胱蛋白9抗體包裝25g
嗎替麥考酚酯/霉酚酯英文名稱: Carvedilol磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝5g
美登DM1英文名稱: Carvedilol磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑抗體包裝2g
美英文名稱: Cediranib磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑抗體包裝25g
咪唑立賓英文名稱: Celecoxib磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑抗體包裝5g
米替福新英文名稱: Celecoxib磷化p21蛋白抗體包裝1g
米托蒽醌英文名稱: Chlortetracycline HCl磷化p21蛋白抗體包裝5g
莫特塞尼英文名稱: Chlortetracycline HCl8號染色體開放閱讀框84抗體包裝1g
奈達鉑;順糖鉑英文名稱: Cilostazol磷化p21蛋白抗體包裝5g
奈拉濱英文名稱: Cilostazol磷化轉錄調節(jié)因子CEBP α 抗體包裝100g
尼羅替尼英文名稱: Cisplatin CLEC2D蛋白抗體包裝1g
帕唑帕尼英文名稱: Cisplatin 富含半胱與表皮生長因子樣蛋白2抗體包裝5g
帕唑帕尼鹽鹽英文名稱: Cisplatin 醌氧化還原樣蛋白1抗體包裝100g
培美曲塞二鈉英文名稱: Cladribine銅代謝結構域蛋白9抗體包裝25g
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規(guī)格:>99%,BR,USP胰島樣生長因子結合蛋白1試劑盒鹽羅格列;Rosiglitazone
分枝枝頂孢Acremonium│furcatum 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品胰島樣生長因子2受體試劑盒鹽吡格列;Pioglitazone
泛菌屬Pantoea│sp. 質量規(guī)格:>850mcg/mg,BR胰島樣生長因子2試劑盒藥根堿;Jatrorrhizine
細胞存活率檢測試劑盒枯草芽孢桿 2,5-二氟-3-血管非炎性蛋白2Elisa
新疆糖絲 4-氨基-2-氯-3-氟CD36分子Elisa
球孢白僵 3-三氟甲基-1H-5-氯吡唑磷脂酰肌1磷酸Elisa
禽腺病 四-(4-甲氧基苯)乙烯磷脂酰肌二磷酸Elisa
白布勒擔孢酵母 (9-苯基-9H-咔唑-2-基)酸基質金屬蛋白抑制因子Elisa
粗柄白蘑 6-乙基吡啶-3-酸基質金屬蛋白Elisa
球孢白僵 3-溴-4-異硫酸基苯血清肌肽Elisa
巴達維亞芽孢桿 6-溴-5-甲基-1H-吲唑胱天蛋白12Elisa
大腸桿 2-氨基-5-溴吡啶-4-羧酸鈣調蛋白激4Elisa
鐮刀(三七根際土壤) Meso-四(3,5-二溴-4-羥基苯基)卟啉基質金屬蛋白6Elisa
魚肉中磺嘧啶、磺甲惡唑質控樣品 聚-L-精氨酸巨病PP65抗原Elisa
Rhizobiales sp. 萘磺酸鈉載脂蛋白BElisa
尖孢鐮刀亞麻專化型 十七烷內聚合Elisa
植物內芽孢桿 DA201大孔樹脂神經生長因子受體Elisa
蘇云金芽胞桿庫爾斯塔克亞種 N-甲基氧基乙酸酯HIV (1+2) 抗原抗體Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)