詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
100T | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
小牛胸腺提取的組蛋白H1,以Alexa Fluor488 標記富含賴氨酸的組蛋白H1。在體外細胞實驗中可以通過搭配相應的蛋白轉染步驟,將Alexa Fluor488 標記的組蛋白H1 結合物導入細胞中,從而跟蹤研究組蛋白H1 在細胞內(nèi)的運輸與定位。 具有細胞膜滲透性的MitoRed 探針包含一個溫和的巰基反應性氯甲基基團,可用于標記線粒體,并在固定之后保留在線粒體內(nèi)。標記線粒體,細胞可以與MitoRed 探針簡單孵育,探針通過被動擴散傳過質膜,并在有活性的線粒體內(nèi)富集。 細胞核熒光染料Hoechst 33258 是一種無毒、水溶性雙苯咪唑類化合物,具有很好的膜透性,可作為熒光探針與DNA 分子結合。 儲存:4℃避光,有效期12個月。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
鹽塞利洛爾(標準品)英文名稱: Triethylenethiophosphoramide核苷轉運蛋白ENT2抗體包裝100g
鹽噻匹定(標準品)英文名稱: Pramipexole Base鳥嘌呤核苷交換因子4包裝25g
鹽賽庚啶(標準品)英文名稱: Pramipexole Base磷化紅膜條帶4.1蛋白抗體包裝5g
鹽賽洛唑啉(標準品)英文名稱: Genistein磷化酪蛋白激受體B1抗體包裝25g
鹽三拉(標準品)英文名稱: Genistein蛋白激受體B1+B2抗體包裝5g
鹽沙沙星;鹽沙拉沙星(標準品)英文名稱: Luteolin磷化神經(jīng)鳥苷置換因子Ephexin1抗體包裝10ml
鹽舍曲林(標準品)英文名稱: Luteolin磷化Ephrin B抗體包裝50ml
鹽雙環(huán)(標準品)英文名稱: Ursolic acid惡性腫瘤丟失蛋白EPLIN抗體包裝100mg
鹽司他斯?。藴势罚┯⑽拿Q: Ursolic acid磷化紅生成受體抗體包裝500mg
鹽四環(huán)(標準品)英文名稱: Diosmetin磷化HER2受體抗體包裝100mg
鹽索他洛爾(標準品)英文名稱: Diosmetin磷化HER2受體抗體包裝100g
鹽坦洛新(標準品)英文名稱: Cytisine磷化HER2受體抗體包裝25g
鹽特比萘芬(標準品)英文名稱: Cytisine磷化HER3受體抗體包裝100g
鹽特拉唑(標準品)英文名稱: Irbesartan磷化HER4抗體包裝25g
鹽替吡嘧啶(標準品)英文名稱: 5'-O-(4,4'-Dimethoxytrityl)-thymidine-3'-O-succinic acid磷化HER4抗體包裝5g
枝芽胞桿菌Virgibacillus│sp. 質量規(guī)格:>99%,五合物糖脂抗體試劑盒三聚;Melamine
香菇Lentinula│edodes 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品糖盞蛋白鼠李糖;L-Rhamnose monoh
大球蓋菇Stropharia│rugosoannulata Farl. ex Murrill 質量規(guī)格:>590IU/MG,BR糖原磷化同工MM試劑盒晶蘭苷;monotropein
線粒體細胞核轉位分析試劑盒(HCS法)斑玉蕈 2-氨基-5-溴-4,6-二甲基吡啶鋅指蛋白703Elisa
文昌野野村氏 2-基-5-氯吡啶草酸Elisa
粉狀畢氏酵母 4-溴-2-氯甲苯肺炎衣原體Elisa
NCI-H647(人肺癌)(通過STR鑒定) 2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯梅螺旋體抗體Elisa
乳桿屬 雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮苯氨酸Elisa
短波單胞屬 N-Boc-4-羥基-L-脯氨酸甲酯(混旋)苯氨酸氫化Elisa
硫色曲霉 2-氯-5-甲氧基苯酸可溶性間粘附分子Elisa
解脂假絲酵母解脂變種 2-甲氧基-5-硝基-3-甲基吡啶可溶性間粘附分子Elisa
雞腿菇 2-硝基-5-溴苯組氨酸脫羧Elisa
紡織品 4-氨基偶氮苯 2-氯-5-氟三氟甲苯鈣釋放激活鈣通道蛋白Elisa
冬青節(jié)桿 5-氯-2-氟-三氟甲苯ORAIL鈣釋放激活鈣通道蛋白Elisa
葡萄座腔 芐基縮水甘油硫氧還蛋白-2Elisa
弗吉尼亞鏈霉 3-溴苯磺酰磷脂DElisa
谷氨酸棒桿 3-溴苯酸脂氧合Elisa
鹽漬芽孢桿屬 5-溴-2-嘧啶甲酸甲酯ERBB受體反饋抑制劑1Elisa