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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-21 12:30:01瀏覽次數(shù)：315
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X9655 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 | 英文名稱 | Alamar Blue |
商品介紹：
阿爾瑪藍(lán)（Alamar Blue）是一種氧化還原指示劑，能根據(jù)代謝活性產(chǎn)生吸亮度變化和熒光信號。這是一種安全無毒的染料，可用于細(xì)胞活性和細(xì)胞增殖的定量分析以及細(xì)胞因子生物測定和體外細(xì)胞毒性研究，能有效測定動(dòng)物、真菌和細(xì)菌細(xì)胞的天然代謝活性。Alamar Blue在氧化狀態(tài)下呈現(xiàn)紫藍(lán)色無熒光性，而在還原狀態(tài)下，轉(zhuǎn)變?yōu)槌史奂t或紅色熒光的還原產(chǎn)物，反映所研究的細(xì)胞或微生物對氧分子的消耗，因而常被用作氧化還原指示劑，以顯示被觀察細(xì)胞和細(xì)菌的代謝活動(dòng)。這種測定是基于具有代謝活性的細(xì)胞將試劑轉(zhuǎn)換成熒光和比色指示劑的能力。在細(xì)胞增殖過程中，細(xì)胞內(nèi)NADPH/NADP、FADH/FAD、FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高，處于還原環(huán)境。攝入細(xì)胞內(nèi)的染料被這些代謝中間體及細(xì)胞色素類還原后釋放到細(xì)胞外并溶于培養(yǎng)基中，使培養(yǎng)基從無熒光的靛青藍(lán)變成有熒光的粉紅色。受損和無活性細(xì)胞具有較低的天然代謝活性，因此對應(yīng)的信號較低?？梢杂闷胀ǚ止夤舛扔?jì)或熒光光度計(jì)檢測，其激發(fā)光波長在530-560 nm之間，發(fā)射光波長為590 nm。吸光度和熒光強(qiáng)度與活性細(xì)胞數(shù)成正比。 本品可廣泛地用于細(xì)胞增殖代謝，藥物的細(xì)胞毒作用的體外測定以及病原微生物的的快速檢測與鑒定。 與臺盼蘭、TTC、MTT、MTS等分析法相比，Alamar Blue具有更多的優(yōu)勢。Alamar Blue采用單一試劑，可以連續(xù)、快速地檢測細(xì)胞的增生狀態(tài)。由于Alamar Blue對細(xì)胞無毒、無害，不影響細(xì)胞的抗體合成與分泌等活性，因此可以對同一批細(xì)胞的增生狀態(tài)進(jìn)行連續(xù)觀察和進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)觀察，因此有操作簡便和幾乎不干擾細(xì)胞正常代謝的特點(diǎn)。 注意事項(xiàng) 1）需客戶自行準(zhǔn)備100%還原型Alamar Blue試劑。為得到還原型Alamar Blue，需配制Alamar Blue與細(xì)胞培養(yǎng)基的混合溶液，Alamar Blue與細(xì)胞培養(yǎng)基的比值為1:10，高壓滅菌15min。（不能對濃縮的Alamar Blue高壓滅菌，也不能用PBS配制溶液，因?yàn)?00%還原型Alamar Blue在PBS中不穩(wěn)定。） 2）為得到結(jié)果，建議實(shí)驗(yàn)前先摸索孵育時(shí)間和接種細(xì)胞數(shù)量。 3）合適密度的細(xì)胞可以增加檢測靈敏度。對于96 孔板，我們建議每孔接種100 微升細(xì)胞，細(xì)胞濃度范圍為：貼壁細(xì)胞在100-10,000/孔，懸浮細(xì)胞在2,000-50,000/孔，并以培養(yǎng)基為空白對照。對于384 孔板，細(xì)胞濃度和接種量均減半。 4）整個(gè)過程均應(yīng)為無菌操作，因?yàn)槲⑸镂廴疚锿瑯涌梢赃€原檢測試劑而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 5）注意接種細(xì)胞濃度和加入檢測試劑后孵育時(shí)間。細(xì)胞濃度過高或孵育時(shí)間過長，會(huì)導(dǎo)致繼發(fā)性還原反應(yīng)，產(chǎn)生無色和熒光消失。 6）孵育時(shí)，須避光。 7）本產(chǎn)品可以使用熒光或分光光度計(jì)檢測，但熒光的靈敏度高，實(shí)驗(yàn)誤差小，推薦使用熒光檢測。 儲存條件：4℃，有效期一年 |
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：阿爾瑪藍(lán)
英文名稱：Alamar Blue
產(chǎn)品規(guī)格：100T
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究；
③細(xì)胞骨架體系的研究；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
腭/肺/鼻上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白(PLUNC)英文名稱：PLUNC ELISA Kit19號染色體開放閱讀框80抗體包裝100g
多效生長因子(PTN)英文名稱：PTN ELISA Kit半胱雙加氧1抗體包裝25g
多配體蛋白聚糖1(SDC1)英文名稱：SDC1 ELISA Kit膠原蛋白11A2抗體包裝5g
多聚免疫球蛋白受體(PIGR)英文名稱：PIGR ELISA KitCUL4B蛋白抗體包裝1g
多聚蛋白2(MMRN2)英文名稱：MMRN2 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框103抗體包裝5g
多功能肽2(LMP2)英文名稱：LMP2 ELISA Kit凋亡抑制因子2抗體包裝25g
多功能蛋白聚糖(VS)英文名稱：VS ELISA Kit促腎上腺皮質(zhì)激釋放激結(jié)合蛋白抗體包裝5g
多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)英文名稱：DAT ELISA Kit3號染色體開放閱讀框23抗體包裝1g
多巴胺受體D4(DRD4)英文名稱：DRD4 ELISA Kit瓜環(huán)肽抗體包裝25g
多巴胺受體D3(DRD3)英文名稱：DRD3 ELISA Kit分裂核仁蛋白1抗體包裝5g
多巴胺受體D1(DRD1)英文名稱：DRD1 ELISA Kit鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激4抗體包裝1g
多胺氧化(PAOX)英文名稱：PAOX ELISA Kit磷化鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激4抗體包裝25g
對氧磷2(PON2)英文名稱：PON2 ELISA Kit膠原蛋白4a2亞基抗體包裝5g
對氧磷1(PON1)英文名稱：PON1 ELISA KitCD161c抗體包裝100g
端粒關(guān)聯(lián)蛋白1(TEP1)英文名稱：TEP1 ELISA Kit補(bǔ)體C1r鏈多肽抗體包裝25g
根瘤菌(紫云英)Mesorhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品孕激/孕試劑盒野馬追內(nèi)酯A;Eupalinolide
: ivcas7.01221資源名稱: 蕈狀芽胞桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>97%,進(jìn)分sigma貨號A3656 鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白試劑盒乙氧基白屈菜紅堿; 5-Ethoxych
: 65092442資源名稱: 羊布氏菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白試劑盒異夏佛塔苷;Isoschaftoside
阿爾瑪藍(lán)水單胞 4-哌酪氨酸抗體Elisa
鏈格孢 2-氧化-6-甲酸甲酯酪氨酸Elisa
枯草芽孢桿 2-[[叔丁氧羰基]甲基氨基]發(fā)熱伴血小板減少綜合征Elisa
香蕉 磺?；且暽窠?jīng)蛋白Elisa
密蘇里游動(dòng)放線 磺磺隆p62Elisa
大腸埃希氏 S-3-BOC-氨甲基吡咯烷S100鈣結(jié)合蛋白A8Elisa
類干酪乳桿 N,N-二甲基-4-((E)-4-((E)-(4-硝基亞芐基)氨基)苯乙烯基)苯普列克底物蛋白Elisa
管毛殼 2-Boc-六氫吡咯并[3,4-c]吡咯前纖維蛋白1抗體Elisa
鏈霉屬 3,5-二溴-4-羥基吡啶14-3-3家族z蛋白Elisa
淡紫紫霉 alpha-溴-2-氯可替寧Elisa
黃色直絲鏈霉 4-氟-3-甲氧基溴芐甘膽酸Elisa
黑木耳 4-氯噻吩[2,3-D]嘧啶阿法骨化Elisa
假單胞 噻吩并[2,3-D]嘧啶-4(3H)-酮磷酸化p38絲裂原活化蛋白激Elisa
短小芽孢桿 羥乙磺酸噴他瞇縮宮Elisa
秦氏蜜環(huán) 4-甲硫基乙酯曼氏裂頭蚴IgG抗體Elisa
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