詳細(xì)介紹
中文名稱:芹菜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:詳見說明書
貨號(hào):GOY-M4708
規(guī)格:50T
相對(duì)定量簡介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡介
公式:
優(yōu)點(diǎn):分析簡單,實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡單
缺點(diǎn):對(duì)每一個(gè)基因,每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;產(chǎn)品僅用于科研這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對(duì)定量方法之一
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時(shí),提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動(dòng)Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對(duì)于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng)、錯(cuò)配率低等優(yōu)點(diǎn)。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增,提高PCR的準(zhǔn)確性。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動(dòng) Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時(shí),只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴(kuò)增。
樣品要求及注意事項(xiàng):
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮,請(qǐng)您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運(yùn)輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動(dòng)植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動(dòng)植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 產(chǎn)品僅用于科研如果提供RNA或cDNA我們要對(duì)您提供的材料進(jìn)行評(píng)估。
4、 實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán),收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào),這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號(hào)階段,熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
佐米曲坦 N氧化物Recombinant Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)犬凝聚素(CLU)ELISA Kit
佐他莫司Recombinant Apoptosis Inducing Factor (AIF)犬腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA Kit
唑來膦酸二鈉Recombinant Cholinergic Receptor, Muscarinic 1 (CHRM1)犬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA Kit
(+)-兒茶素水合物Recombinant Cholinergic Receptor, Muscarinic 2 (CHRM2)犬內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA Kit
(S)-10-羥基喜樹堿;10-羥基喜樹堿Recombinant Telomerase Associated Protein 1 (TEP1)犬內(nèi)皮生長因子受體(EGFR)ELISA Kit
3-羥基黃酮Recombinant Dopamine Receptor D1 (DRD1)犬內(nèi)素(ET)ELISA Kit
5-羥色胺酸(5-HTP)Recombinant Dopamine Receptor D2 (DRD2)犬繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA Kit
7-羥基-4-基香豆素Recombinant Dopamine Receptor D3 (DRD3)犬免疫球蛋白M(IgM)ELISA Kit
7-基-10-羥基喜樹堿(SN-38)Recombinant Dopachrome Tautomerase (DCT)犬免疫球蛋白G(IgG)ELISA Kit
7-基喜樹堿Recombinant Large Multifunctional Peptidase 2 (LMP2)犬免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit
alpha-熊果苷Recombinant Polymeric Immunoglobulin Receptor (PIGR)犬免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit
ConvallatoxinRecombinant Pleiotrophin (PTN)犬硫酸雌酮(E1S)ELISA Kit
阿魏酸,松柏酸,反式阿魏酸Recombinant Multidrug Resistance Associated Protein 1 (MRP1)犬粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA KitGLUCAGON HYDROCHLORIDE(HUMAN) 齊墩果酸-3-O-β-D葡萄糖( 1→3)-α-L-鼠李糖(1→2)-α-L-阿拉伯糖苷
芹菜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒Tetraammineplatinum dinitrateChicken PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) ELISA Kit
NA 司盤40
1H-Tetrazole-1-acetic acidChicken ELN (Elastin) ELISA Kit
Potassium ethylate 黃花敗醬甙C
TETRAIODOETHYLENEChicken PDIA5 (Protein Disulfide Isomerase A5) ELISA Kit
EC 1.1.1.1 司盤20
ERYTHROSIN BChicken FGF4 (Fibroblast Growth Factor 4) ELISA Kit
ALCOHOL OXIDASE 五味子酚
TETRABUTYLAMMONIUM FLUORIDEChicken EFNA1 (Ephrin A1) ELISA Kit
ETHYLENEDIAMINETETRAACETIC DIANHYDRIDE 環(huán)偶氮脒類引發(fā)劑V601
Tetrabutyl ammonium chloride hydrateChicken CP (Ceruloplasmin) ELISA Kit
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。