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          活細(xì)胞核染料(紅)

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-21 14:52:22瀏覽次數(shù):305

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500μL
          貨號 GOY-01X9785 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
          活細(xì)胞核染料(紅)公司正在出售的產(chǎn)品:Nrn1/Cpg15/Neuritin 轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體四丁硫氫銨 98%
          Neurocan 神經(jīng)粘蛋白抗體四丁硫氫銨 離子對色譜
          NGB 腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白抗體四丁溴化 98%
          NeuroD1 神經(jīng)元分化因子1抗體三鹽鹽 for HPLC, ≥99.0%
          Neurofascin/Nfasc155 神經(jīng)束蛋白-155三鹽鹽 99%
          NT 神

          詳細(xì)介紹

          以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:

          中文名稱

          英文名稱

          產(chǎn)品規(guī)格

          發(fā)貨周期

          活細(xì)胞核染料(紅)


          500μL

          1~3天

           

          公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

          1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

          2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

          3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

          二.細(xì)胞處理:

          1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

          2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

          對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

          方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          商品介紹:

          新型活細(xì)胞核酸染料( Ex/Em:647/660 nm, bound to DNA)是一種具有細(xì)胞膜透性的核酸染料,其在于核酸結(jié)合之后熒光強度會得到顯著增強。Nuclear View Red 活細(xì)胞核酸染料可以用于染死的或者活的真核細(xì)胞的RNA 和DNA,在革蘭氏細(xì)菌中同樣也適用。新型活細(xì)胞核酸染料具有如下重要特性:

          細(xì)胞膜透性,可以穿過幾乎所有的細(xì)胞膜,包括哺乳動物細(xì)胞和細(xì)菌。

          極低的熒光背景,未與核酸結(jié)合時,染料的量子產(chǎn)率通常<0.01。

          與核酸結(jié)合之后,量子產(chǎn)率通常> 0.4。

          活細(xì)胞核酸染料可以在不同的實驗應(yīng)用中染活細(xì)胞或者固定細(xì)胞的核酸,能夠與配備了常規(guī)激光激發(fā)器或?qū)拵д彰鞴庠吹母鞣N熒光檢測設(shè)備匹配。

          佳的染色探針濃度取決于不同的應(yīng)用程序類型,此處建議的初始條件是基于驗證的特定細(xì)胞類型,具體實驗中應(yīng)摸索加以調(diào)整。

          儲存:-20℃,有效期六個月。

          操作步驟:

          1. 樣品染色

          1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

          2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

          對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

          3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。

          4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

          5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

          2. 樣品檢測

          1) 流式細(xì)胞儀檢測:

          染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。

          建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

          2) 熒光顯微鏡檢測:

          染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。

          普魯雜質(zhì)A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pantoprazole Sodium無胸腺癥相關(guān)蛋白DGCR6/迪格奧爾格綜合征關(guān)鍵基因6抗體包裝5g

          鹽羅格列雜質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fasudil hydrochloride朊蛋白DPL抗體包裝100mg

          鹽羅哌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fasudil hydrochloride肌強直性營養(yǎng)不良蛋白激抗體包裝1g

          鹽羅哌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rhodionin有絲分裂控制蛋白dis3抗體包裝1g

          鹽羅哌右旋體(鹽羅哌雜質(zhì)B)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rhodiosin肝癌新基因3蛋白抗體包裝5g

          鹽羅通定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dideoxyinosine;DidanosineDapper2蛋白抗體包裝25g

          鹽洛美沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Icariin I;  Icariside IDapper3蛋白抗體包裝5g

          鹽馬尼地平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Baohuoside II背神經(jīng)管核蛋白抗體包裝1g

          鹽馬普替林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sophoricoside雙基精解1抗體包裝25g

          鹽嗎啉胍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sophoricoside絲/蘇蛋白激DCAMKL1抗體包裝5g

          鹽美金剛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methylophiopogonanone A 唐氏綜合征粘附分子抗體包裝25g

          鹽美利曲辛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methylophiopogonanone B磷脂磷HTPAP抗體包裝5g

          鹽美司坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 7,2-Dihydroxy-3,4-Dimethoxyisoflavan穿膜蛋白DLK1抗體(C端)包裝25g

          鹽美西律(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3-Hydroxy-9,10-Dimethoxypterocarpan二氫葉還原樣1抗體包裝5g

          鹽咪達(dá)普利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oroxyloside脫氧尿苷三磷DUT抗體包裝1g

          : 3alvar.2B.3339資源名稱: 乙型副傷寒沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品同型半胱試劑盒松脂二葡萄糖苷;Pinoresinol

          繩索狀芽孢桿菌Bacillus│funiculus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR鐵-過氧化物岐化試劑盒棗仁皂苷B;Jujuboside B

          黏著海桿菌Marinobacter│adhaerens 質(zhì)量規(guī)格:>99%以上,S-構(gòu)型無結(jié)晶鐵調(diào)25試劑盒棗仁皂苷A;Jujuboside A
          活細(xì)胞核染料(紅)葉生布勒擔(dān)子酵母 雜氮雙環(huán)磷酸酯葡糖氨基聚糖Elisa

          谷氨酸棒桿 3-乙?;?6-氯咪唑并[1,2-B]噠多配體聚糖-1Elisa

          大腸埃希氏 抗氧劑 LK-1081Ras三磷酸鳥苷激活樣蛋白Elisa

          柔嫩艾美耳球蟲 2-氯-4-肼血管抑Elisa

          Methylobacterium variabile 3-乙氧基苯酸吡啶并林Elisa

          金耳 2,3-二甲氧基磷脂酰肌抗體Elisa

          DB (彌漫大B瘤) (通過STR鑒定) 8-氨基-6-甲氧基喹啉抗磷脂酰絲氨酸凝血原復(fù)合物IgG抗體Elisa

          炭疽芽胞桿 聚乙烯肉桂酸酯抗磷脂酰絲氨酸凝血原復(fù)合物IgM抗體Elisa

          *蛹蟲草 肉堿富馬酸鹽凝血IgG抗體Elisa

          離中不粘柄 3-氯-5-氟芐凝血IgM抗體Elisa

          海洋沉積物芽孢桿 3,5-二氟苯布魯氏桿IgG抗體Elisa

          彎曲假單胞 N-甲基-3-氟芐布魯氏桿IgM抗體Elisa

          果生鏈核盤 (3S,4S)-1-芐基吡咯烷-3,4-二布魯氏桿IgA抗體Elisa

          芽胞桿 2-羥基-2-甲基-N-[4-基--3-(三氟甲基)苯基]-3-[4-(氟苯基)硫]酰B瘤因子3Elisa

          生黑鏈霉 1,2-環(huán)氧-2-甲基-N-[4-基--3-(三氟甲基)苯基]-烯酰肝配蛋白A1Elisa

           


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