商品介紹:
本品是一種非常強(qiáng)的Caspase 3抑制劑,可以抑制由Caspase3激活導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡。也可以抑制Caspase 7。本品是一種可逆的Caspase 3抑制劑,也是常用的細(xì)胞凋亡抑制劑之一,常用于觀(guān)察特定的細(xì)胞凋亡是否通過(guò)Caspase 3激活來(lái)介導(dǎo)。可以用于抑制培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)的Caspase 3,也可用于抑制體外純化或粗抽提的Caspase 3。在體外對(duì)Casapse 3的IC50=200pM。本品10mM包裝產(chǎn)品配制在DMSO中,可以直接使用。5mg包裝為粉末裝。 分子式:C20H30N4O1 分子量:502.5 純度:>95%。 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期一年。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀(guān)察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀(guān)察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
缺血修飾白蛋白(IMA)英文名稱(chēng):IMA ELISA Kit絲抑制蛋白激C底物抗體包裝1g
醛固(ALD)英文名稱(chēng):ALD ELISA Kit核突觸蛋白α抗體包裝5g
全段狀旁腺(i-PTH)英文名稱(chēng):i-PTH ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白4B抗體包裝500g
去腎上腺(NE)英文名稱(chēng):NE ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血1型-12抗體包裝10MG
去腎上腺(NA)英文名稱(chēng):NA ELISA Kitα-輔肌動(dòng)蛋白4(內(nèi)參)抗體包裝1g
趨化因子配體1(CCL1)英文名稱(chēng):CCL1 ELISA Kit堿性磷抗體包裝250mg
趨化因子5(CCL5/RANTES)英文名稱(chēng):CCL5/RANTES ELISA KitAU1 tag標(biāo)簽抗體包裝100g
趨化因子(fractalkine/CX3CL1)英文名稱(chēng):fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit脂肪增強(qiáng)結(jié)合蛋白1包裝25g
趨化因子(FK)英文名稱(chēng):FK ELISA Kit蛋白激B包裝5g
趨化因子(CC基序)配體2(MRC2)英文名稱(chēng):MRC2 ELISA Kit蛋白激B包裝100g
羥脯(Hyp)英文名稱(chēng):Hyp ELISA Kit血管生成樣蛋白2抗體包裝25g
羥基戊二單酰還原(HMG-CoAR)英文名稱(chēng):HMG-CoAR ELISA Kit血管生成3/血管生成4抗體包裝5g
羥基戊二單酰(HMG-CoA)英文名稱(chēng):HMG-CoA ELISA Kit膜粘連蛋白 I抗體包裝100ml
前心鈉肽(Pro-ANP)英文名稱(chēng):Pro-ANP ELISA Kit膜粘連蛋白 Ⅱ抗體包裝500ml
前列腺特異性抗原(PSA)英文名稱(chēng):PSA ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝1g
雙鏈RNA腺苷脫基抗體(N端)免疫球蛋白M(IgM)CAL-101 (Idelalisib, GS-1101) is a selective p110δ inhibitor with IC50 of 2.5 nM
Caspase 3抑制劑(Ac-DEVD-CHO)棲植物潘隆尼亞堿湖桿 天然椰子粉白介素18檢測(cè)試劑盒
馬褂木炭疽盤(pán)孢 3-氯苯乙白介素19檢測(cè)試劑盒
阿姆斯特丹曲霉 甘草酸二銨鹽白介素1β檢測(cè)試劑盒
蒙氏假單胞 三溴新戊白介素1受體拮抗劑檢測(cè)試劑盒
糙皮側(cè)耳 吡蟲(chóng)啉白介素2檢測(cè)試劑盒
暗產(chǎn)色鏈霉 2-氟乙酰乙酸乙酯白介素21檢測(cè)試劑盒
枯草芽孢桿 對(duì)羥基苯甲白介素21受體檢測(cè)試劑盒
波羅的海萊茵海默氏 α-熊果苷白介素22檢測(cè)試劑盒
擬莖點(diǎn)霉 彈性體聚多元白介素23檢測(cè)試劑盒
大腸埃希氏桿 莫柔比星白介素24檢測(cè)試劑盒
副豬嗜血桿 ADS-8吸附樹(shù)脂白介素25檢測(cè)試劑盒
貪噬屬 1-甲基-3-基化咪唑嗡白介素26檢測(cè)試劑盒
枯草芽孢桿 地奧司明白介素27檢測(cè)試劑盒
釀酒酵母 當(dāng)歸酸白介素28檢測(cè)試劑盒
黑曲霉 大黃酸白介素28A檢測(cè)試劑盒