公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:吉姆薩染色液
英文名稱:Giemsa Stain Solution
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
本品以進口的吉姆薩色素、甲醇為主要原料,含*襯染劑,經(jīng)研磨配制而成,能呈現(xiàn)出清晰的細胞染色效果。經(jīng)常用于組織切片、血液和細胞涂片、細菌、染色體顯帶、原生動物寄生蟲等染色。吉姆薩染色液由吉姆薩貯存液(10×)和磷酸鹽緩沖液組成,10×貯存液可以單獨使用,也可以1:9混合成工作液后使用。 吉姆薩色素是由天青Ⅱ與伊紅混合而成。吉姆薩染色原理和結果與瑞氏染色基本相同,吉姆薩染色液對胞漿著色力較強,能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,特別是對血液和骨髓細胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜堿性顆粒,著色清晰,但是對細胞核著色偏深,核結構顯色不佳,故吉姆薩染液常與瑞氏染液聯(lián)合使用。 一、一步法涂片染色 1、吉姆薩工作液的配制: 按吉姆薩貯存液(10×):磷酸鹽緩沖液=1:9混合,即取1份吉姆薩儲存液(10×)加入到9份的磷酸鹽緩沖液中充分混勻,即為吉姆薩工作液,該工作液為即用型試劑,不易保存,即用即配。 2、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1-3分鐘。 3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加吉姆薩工作液覆蓋涂片,室溫滴染。 4、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗。 5、干燥、鏡檢。 6、染色結果: 嗜酸性顆?!奂t色; 嗜堿性顆?!纤{色; 中性顆?!仙?/span> 二、兩步法涂片染色 1、吉姆薩工作液的配制: 按吉姆薩貯存液(10×):蒸餾水=1:4混合,即取1份的吉姆薩貯存液(10×)加入到4份的蒸餾水中充分混勻,即為吉姆薩工作液。吉姆薩工作液為即用型試劑,不易保存,即用即配。 2、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定。 3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加適量吉姆薩工作液覆蓋涂片,室溫滴染。 4、加入等量磷酸鹽緩沖液,輕輕晃動載玻片,室溫靜置。 5、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
鹽拉貝洛爾(標準品)英文名稱: trans-Zeatin脫氫/還原家族成員2抗體包裝1g
鹽雷莫司瓊(標準品)英文名稱: Dipotassium tetrachloroplatinate牙本質磷蛋白抗體包裝25g
鹽雷尼替?。藴势罚┯⑽拿Q: CycloastragenolDermokine β蛋白抗體包裝5g
鹽(標準品)英文名稱: Aristolochic acid ADPCR1蛋白抗體包裝25g
鹽利托君(標準品)英文名稱: Purpurin表皮源性蛋白6抗體包裝5g
鹽林可霉(標準品)英文名稱: Jujuboside D雙特異性蛋白磷7抗體包裝1g
鹽硫必利(標準品)英文名稱: Pseduoprotodioscin雙特異性蛋白磷26抗體(絲裂原活化蛋白激磷8)包裝5g
鹽硫利達(標準品)英文名稱: Oxypaeoniflorin阿米洛利結合蛋白1抗體包裝1mg
鹽魯拉西(標準品)英文名稱: 3-isomangostinS期激活化蛋白DBF4A抗體包裝1g
那林(標準品)英文名稱: Naringin dihydrochalcone著絲粒相關蛋白DSN1抗體包裝5g
(標準品)英文名稱: Hygromycin B雙皮層蛋白結構域蛋白DCDC2抗體包裝250mg
己定(標準品)英文名稱: Apiin 神經(jīng)干樹突調節(jié)蛋白DAGLα抗體包裝25g
米帕明/咪(標準品)英文名稱: Chrysoeriol 7-O-glucoside對接蛋白4抗體包裝5g
哌?。藴势罚┯⑽拿Q: Kaempferol-3-O-rutinosideDULLARD蛋白抗體包裝100g
普魯(標準品)英文名稱: Pantoprazole Sodium絲/蘇蛋白激MNB抗體包裝25g
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規(guī)格:>98%,BR銅鋅-過氧化物岐化試劑盒三十烷;1-Triacontanol
炭疽芽胞桿菌Bacillus│anthracis 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品銅藍蛋白試劑盒雙去氧基姜黃;Bisdemethoxy
: JCM13192=CIP109020=KCTC22434=NBRC101534=NRRLB-41137資源名稱: Gramellaportivictoriae 質量規(guī)格:>99%,BR同源框A3試劑盒薯蕷皂苷;Dioscin
吉姆薩染色液短桿狀馬賽 (4-氧基羰基)苯基酸24s羥基膽固Elisa
土星孢青霉 2-乙酰苯甲丁酸Elisa
柱形矛束霉 3-氟-4'-基聯(lián)苯酸Igκ鏈V-I區(qū)D-13Elisa
費雷生枝霉 4,4'-二甲氧基二苯甲酮Igκ鏈V-3區(qū)HK105Elisa
平臍儒孢 4-溴-3-甲基乙酰苯Plexin域包含蛋白2Elisa
盾形環(huán)柄菇 3-氯-4-乙氧基-2-氟苯酸含NLR家族Pyrin域蛋白3Elisa
西瓜枯萎?。捎啠?/span> 1-溴-3-氯-4-乙氧基-2-氟苯基質金屬蛋白2原Elisa
大腸埃希氏桿 4,6-二甲氧基-2-甲巰基嘧啶細絲蛋白AElisa
側耳 2-甲基-5-嘧啶甲分泌型磷脂A2Elisa
枯草芽孢桿 2-甲基巰基嘧啶-5-甲抗谷氨酸受體IgG抗體Elisa
蓖麻油鑒別試劑 4-溴苯甲酰苯基質金屬蛋白1原Elisa
紅淡紫灰鏈霉 2-溴-3-氨基-5-氯吡啶阿米巴原蟲Elisa
麥芽糖假絲酵母 4-(2-吡啶基)苯酸頻哪酯弓蛔蟲IgG抗體Elisa
中國臺灣無色需堿 (3-羥甲基-4-甲氧基苯基)酸人類嗜TV型病Elisa
細鏈格孢 5-甲氧基異喹啉B7-H4Elisa