中性紅染色液(活細(xì)胞染色用)公司正在出售的產(chǎn)品：Nox3/NADPH oxidase 3 有絲分裂氧化2抗體3,4,5-氧苯 99%
NOX4/NADPH oxidase 4 NADPH氧化NOX家族的成員4抗體硫脲 ACS, ≥99.0%
Nanog 胚胎干關(guān)鍵蛋白抗體硝氧鋯 水合物 AR,99.5%
NAIF1 protein 核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1二氧化鋯 AR,99.0%
Natre

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
鹽吡格列雜質(zhì)/5-{4-[2-(5-乙基-2-吡啶...英文名稱： Tulathromycin ADHX15蛋白抗體包裝5g

鹽表阿霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Latamoxef sodiumDIAPH2蛋白抗體包裝1g

鹽卡特羅（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Procyanidin磷化蓬亂蛋白2抗體包裝250mg

鹽美(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： ProcyanidinWnt通路抑制因子2抗體包裝1mg

鹽米（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Piperine磷化B淋巴銜接分子DAPP1抗體包裝100g

鹽帕他莫(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Piperine磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體包裝25g

鹽哌維林（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pneumocandin B0冷休克蛋白DBPA抗體包裝500g

鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Formoterol  脫帽1A抗體包裝250g

鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Homatropine Methyl Bromide 清道夫脫帽/熱休克蛋白1抗體包裝1g

鹽布替萘芬（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Abiraterone Acetate干擾調(diào)節(jié)因子4結(jié)合蛋白抗體包裝5g

鹽達克羅寧（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： BrimonidineDNA交聯(lián)修復(fù)蛋白1C抗體包裝100g

鹽氮卓斯汀（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Asulam磷化凋亡相關(guān)蛋白激2抗體包裝25g

鹽地巴唑（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Asulam凋亡相關(guān)蛋白激樣蛋白1抗體包裝5g

鹽地布(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Bepotastine besilate磷化凋亡相關(guān)蛋白激1抗體包裝25g

鹽地爾硫卓（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sodium copper chlorophyllin牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1抗體包裝5g

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品脫氧核糖核Ⅰ試劑盒苷;Kaempferitrin

鹽反硝化枝芽孢桿菌Virgibacillus│halodenitrificans 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,超純,BP2010,BR,可用于培養(yǎng)脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉試劑盒三葉豆紫檀苷;Trifolirhizin

類諾卡氏菌Nocardioides│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品脫氫表雄硫酯試劑盒矢車菊-3-O-葡萄糖苷;Cyanid
中性紅染色液(活細(xì)胞染色用)大腸桿 2-(三氟甲基)吩噻胞質(zhì)5核苷酸1A抗體Elisa

Pseudoxanthomonas 1-烯基環(huán)磺酰氯血管內(nèi)皮鈣黏蛋白抗體Elisa

絨奧德蘑 1-乙基-3-甲基咪唑雙鹽血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體Elisa

斑點青霉 N-Boc-氨基炔二型腺相關(guān)病Elisa

耐寒短桿 1-(4-甲氧基-3-(3-甲氧基氧基)苯基)-3-甲基-1-丁酮腺相關(guān)病Elisa

圈卷產(chǎn)色鏈霉 3-十四烷基噻吩；滲透增強蛋白樣Elisa

炭疽健康皮張抗原 2,6-二甲基哌死骨片1-泛結(jié)合蛋白P62Elisa

凝結(jié)芽胞桿 2,6-二甲基哌轉(zhuǎn)錄激活因子MYBElisa

巨大芽孢桿 2,4-二氟甲酯醌NADH脫氫1Elisa

雅致放射毛霉 6(5H)-5-氮雜菲酮CCAAT增強子結(jié)合蛋白αElisa

解淀粉芽孢桿 4-氨基-6-氯-2-甲硫基嘧啶甲基胞嘧啶雙加氧2Elisa

微小根毛霉 1-乙基-6,7,8-三氟-1,4-二氫-4-氧代-3-喹啉甲酸乙酯增強因子-1Elisa

根瘤 3-甲基吡啶-N-氧化物Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1Elisa

畢赤酵母 二酸單乙酯跨膜受體蛋白Notch-1Elisa

斯瓦特貝赫山克里布所 3,5-二硫脲白介36γElisa