以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
Nylidrin hydrochloride是被動(dòng)致敏大鼠腹腔肥大細(xì)胞中IgE介導(dǎo)的組胺釋放抑制劑,具有抗過敏的功效。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):849-55-8 別名:Buphenine hydrochloride 純度:98.91% 分子量:335.87 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
假單胞菌胰羧肽B1抗體Human CEP63 ELISA Kit山羊促卵泡(FSH)免疫試劑盒
蕈狀芽孢桿菌維甲結(jié)合蛋白2抗體Human CARS (Cysteine–tRNA ligase, cytoplasmic) ELISA Kit山羊促甲狀腺(TSH)免疫試劑盒
亞鉤針孔菌2號(hào)染色體開放閱讀框80抗體Human CSNK1D(Casein Kinase 1 delta) ELISA Kit山羊雌激(E)免疫試劑盒
卡伍爾鏈霉菌磷化CD32B抗體Human CCT3 ELISA Kit山羊雌二(E2)免疫試劑盒
帕氏食氫產(chǎn)水菌過敏C3(補(bǔ)體C3)抗體Human CD1A ELISA Kit山羊超氧化物歧化2,線粒體(SOD2)免疫試劑盒
雀斑蘑菇癌胚抗原相關(guān)粘附分子抗體Human CASP6(Caspase 6) ELISA Kit山羊超氧化物歧化1,可溶性(SOD1)免疫試劑盒
黑曲霉質(zhì)多聚腺苷結(jié)合蛋白1抗體Human CD209 ELISA Kit山羊超氧化物歧化(SOD)免疫試劑盒
浸麻類芽孢桿菌半胱蛋白抑制劑7抗體Human Cathepsin H ELISA Kit山羊補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒
伯頓畢赤酵母22號(hào)染色體開放閱讀框29抗體Human CCDC158 (Coiled-coil domain-containing protein 158) ELISA Kit山羊補(bǔ)體蛋白3(C3)免疫試劑盒
解烷烴游動(dòng)微菌神經(jīng)表面蛋白F3Human CBP20 (NCBP 20 kDa subunit) ELISA Kit山羊二(MDA)免疫試劑盒
盤長孢狀盤孢組織蛋白C抗體Human CCDC83 ELISA Kit山羊胞外超氧化物歧化[Cu-Zn](SOD3)免疫試劑盒
Microvirga aerophila 半胱蛋白蛋白-4抗體Human CCDC25 (Coiled-coil domain-containing protein 25) ELISA Kit山羊白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒
玫瑰綠色鏈霉菌活化半胱蛋白蛋白3抗體Human CCKBR(Gastrin/cholecystokinin type B receptor) ELISA Kit山羊白介6(IL-6)免疫試劑盒
魔鬼弧菌7號(hào)染色體開放閱讀框61抗體Human CCNI2 ELISA Kit山羊白介4(IL-4)免疫試劑盒
溥硬皮馬勃少突膠質(zhì)跨膜蛋白抗體Human CAMK2D(CaMKII delta) ELISA Kit山羊白介2受體(IL-2R)免疫試劑盒
鉤狀木霉激分子B7-1蛋白抗體Human CaMKIV (Calcium/calmodulin-dependent protein kinase type IV) ELISA Kit山羊白介2(IL-2)免疫試劑盒
地中海馬特爾氏菌Martelella│mediterranea 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPC4,SFRS1互動(dòng)蛋白1試劑盒鄰氧基肉桂
側(cè)柄褐孔菌Fuscoporia│discipes 質(zhì)量規(guī)格:BRP53抗體ELISA Kit雷帕霉
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格:鉍含量:>56%,BRP2蛋白抗體試劑盒克班寧
組胺釋放抑制劑(Nylidrin hydrochloride)葡聚糖D20/右旋糖苷英文名稱: Phospholipase A2 ActivatingPeptide蛋白酪磷-1B抗體包裝1g
普拉克索堿英文名稱: PhysalaeminCyclin A1相互作用蛋白抗體包裝5g
普拉洛芬英文名稱: PKI-tide野生型P53誘導(dǎo)基因1單克抗體包裝1g
普侖司特英文名稱: Plaet Factor 4 (58-70)(human)多囊腎蛋白1抗體包裝1g
普瑞巴林英文名稱: Pneumadin (human)多囊腎蛋白2抗體包裝250mg
齊多夫定英文名稱: Pneumadin (rat)凋亡相關(guān)蛋白4抗體包裝2ml
齊留通英文名稱: Prion Peptide (106-126),Human磷脂酰肌激催化亞單位D抗體包裝25g
羥磺鈣英文名稱: Proadrenomedullin (1-20)(human)血小板源性生長因子受體β樣蛋白抗體包裝5g
氫化奎寧定;雙氫奎尼丁英文名稱: Proadrenomedullin (45-92)(human)磷化磷酯Cβ3抗體包裝25ml
氫檳榔堿(進(jìn)口)英文名稱: Protein Kinase C (19-31)磷化蛋白激樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激抗體包裝5ml
氫檳榔堿; 檳榔堿氫鹽(國產(chǎn))英文名稱: Protein Kinase C (19-36);Protein Kinase C Selective Inhibitor Protein6磷果糖激2抗體包裝100g
氫達(dá)非那新英文名稱: Protein Kinase C (530-558)磷化6磷果糖激2抗體包裝1g
氫后馬托品英文名稱: pTH-Related Protein Splice Isoform 3 (140-173) (human)磷化磷脂酰肌激抗體包裝25g
氫加蘭他敏英文名稱: pTH (13-34) (human)磷化蛋白激C α/β2抗體包裝5g
氫右美沙芬英文名稱: pTH (3-34) (bovine)蛋白激C α抗體包裝100g