產(chǎn)品屬性:
中文名稱:IL-12/IL-23抑制劑(Apilimod)
英文名稱:Apilimod
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Apilimod是IL-12/IL-23的有效抑制劑,抑制人和猴的PBMC細(xì)胞中的IL-12,IC50值為1nM和2nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:541550-19-0 別名:STA 5326 純度:99.49% 分子量:418.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
香菇腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗體Human CEP55 ELISA Kit山羊骨形成蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒
黃色短桿菌半胱蛋白蛋白-12抗體Human CD9(CD9 antigen) ELISA Kit山羊骨堿性磷(BALP)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌角蛋白17抗體Human CD94 ELISA Kit山羊骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌CD38抗體Human CEP63 ELISA Kit山羊骨保護(hù)(OPG)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌CD38抗體Human CDC25A ELISA Kit山羊谷胱甘肽還原(GSR)免疫試劑盒
Paracoccus碳酐1抗體Human CD32 ELISA Kit山羊谷胱甘肽過氧化物(GSH-PX)免疫試劑盒
異常漢遜酵母碳酐2抗體Human CDC14B ELISA Kit山羊孤腓肽(OFQ/N)免疫試劑盒
露濕漆斑菌絲/蘇蛋白質(zhì)激抗體Human CEP68 ELISA Kit山羊睪(T)免疫試劑盒
玫瑰色紅球菌α-連環(huán)蛋白抗體(鈣粘蛋白相關(guān)蛋白)Catenin αHuman CEP290 ELISA Kit山羊肝脂(HL)免疫試劑盒
巨獸芽孢桿菌癌易感基因2相互作用蛋白抗體Human CD4(T-cell surface glycoprotein CD4) ELISA Kit山羊膽囊收縮/縮膽囊八肽(CCK-8)免疫試劑盒
肺炎鏈球菌質(zhì)連接蛋白1抗體Human CEP350 ELISA Kit山羊催乳(PRL)免疫試劑盒
地衣芽孢桿菌盤狀結(jié)構(gòu)域受體蛋白2抗體Human CD9(CD9 antigen) ELISA Kit山羊催產(chǎn)(OT)免疫試劑盒
清酒假絲酵母膜糖蛋白CD200抗體Human CEP44 ELISA Kit山羊促性腺激釋放激(GnRH)免疫試劑盒
布拉克須霉胰羧肽A1抗體Human CD81(CD81 antigen) ELISA Kit山羊促生長激釋放激(GHRH)免疫試劑盒
干酪乳桿菌羧肽A2抗體Human CEP55 ELISA Kit山羊促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)免疫試劑盒
茄鏈格孢腦源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗體Human CD94 ELISA Kit山羊促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)免疫試劑盒
副流感病毒Respirovirus│Parainfluenza virus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPodocin ELISA Kit蘿卜硫
黃海芽孢桿菌Bacillus│marisflavi 質(zhì)量規(guī)格:BRPL7抗體/抗蘇酰tRNA合成試劑盒羅丹明B
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:BRPL12抗體/抗酰tRNA合成試劑盒六氫吡啶羧
IL-12/IL-23抑制劑(Apilimod)奈帕芬英文名稱: Osteostatin (human)原鈣粘附蛋白α2抗體包裝1g
萘普生英文名稱: Osteostatin (1-5) amide(human, bovine, dog, horse,mouse, rabbit, rat)配對盒同源基因4抗體包裝5g
萘普生鈉英文名稱: Osteostatin amide (human)白蛋白3抗體包裝1ml
尼卡巴英文名稱: p60 v-src (137-157)PRELP蛋白抗體包裝1g
尼美舒利英文名稱: p60c-src Substrate ILys(Biotin)原鈣粘附蛋白10抗體包裝5g
帕米磷二鈉英文名稱: PACAP-27 (human, mouse,ovine, porcine, rat)原鈣粘附蛋白β1抗體包裝10g
帕米膦英文名稱: PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)原鈣粘附蛋白β10抗體包裝1g
帕潘立英文名稱: PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)原鈣粘附蛋白β6抗體包裝100g
泮托拉唑鈉1.5合物英文名稱: PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)原鈣粘附蛋白β14抗體包裝500g
泮托拉唑鈉一物英文名稱: Pancreatic Polypeptide,human鈣粘蛋白LKC抗體包裝5mg
替佐米中間體I英文名稱: Pancreatic Polypeptide, ratPLEKHA7蛋白抗體包裝5g
匹多莫德英文名稱: Parathyroid Hormone (1-38),human鈣粘蛋白21抗體包裝100g
匹卡米英文名稱: Pentagastrin鈣粘蛋白β12抗體包裝10g
匹可硫鈉;匹克硫鈉英文名稱: Peptide YY, Human磷化磷脂酰肌激調(diào)節(jié)亞單位gamma抗體包裝25g
撲熱息痛/對乙?;佑⑽拿Q: Peptide YY (canine, mouse,porcine, rat)狀旁腺相關(guān)蛋白抗體包裝25mg
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)