以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
Irsogladine是PDE4抑制劑和毒蕈堿乙酰膽堿受體結(jié)合劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:57381-26-7 別名:Dicloguamine 純度:99.54% 分子量:256.09 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
格氏乳球菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體Human ASGR2(Asialoglycoprotein Receptor 2) ELISA Kit人蘭尼堿受體2(RYR2)免疫試劑盒
脫皮毛球馬勃*膽固氧化抗體Human ASK-1(Apoptosis Signal Regulating Kinase 1) ELISA Kit人蘭尼堿抗體免疫試劑盒
金灰青霉半胱蛋白蛋白14抗體Human AP17(Apelin 17) ELISA Kit人賴酰氧化免疫試劑盒
香菇半胱蛋白蛋白5抗體Human AP13(Apelin 13) ELISA Kit人賴特異性脫甲基5A(JARID1A)免疫試劑盒
黑曲霉豬瘟病抗體Human AP(Allopregnanolone) ELISA Kit人醌NADH脫氫1(NQO1)免疫試劑盒
蒼白桿菌屬豬瘟病抗體Human ANG II R1-Ab(Angiotensin II Receptor 1 Antibody) ELISA Kit人跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員11(MS4A11)免疫試劑盒
灰黃鏈霉菌嗜鉻粒蛋白C抗體Human ANG II(Angiotensin II) ELISA Kit人空泡相關(guān)蛋白A(VacA)免疫試劑盒
巴氏醋桿菌煙堿型乙酰膽堿受體α10/AChRα10抗體Human ANGPTL1(Angiopoietin Like Protein 1) ELISA Kit人空腸彎曲菌(CJ)抗體(IgM)免疫試劑盒
大腸埃希菌煙堿型乙酰膽堿受體α6/AChRα6抗體Human ANGPTL6(Angiopoietin Like Protein 6) ELISA Kit人空腸彎曲菌(CJ)抗體(IgG)免疫試劑盒
釀酒酵母煙堿型乙酰膽堿受體α9/AChRα9抗體Human Ang III(Angiotensin III) ELISA Kit人克雷白氏桿菌(klebsiella)免疫試劑盒
木拉克酵母屬煙堿型乙酰膽堿受體δ/AChRδ抗體Human Anti-Surv(Anti-Survivin Antibody) ELISA Kit人克拉拉蛋白(CC16)免疫試劑盒
植物乳桿菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體Human ANKRD1(Ankyrin Repeat Domain 1) ELISA Kit人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)免疫試劑盒
耐熱鹽土生古菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體Human AP(Allopregnanolone) ELISA Kit人可溶性腫瘤壞死因子受體2(sTNF-R2)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌枯草亞種β衣被蛋白抗體Human AP17(Apelin 17) ELISA Kit人可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)免疫試劑盒
紋黑蛋巢半胱蛋白4/11抗體Human ATF-1(Activating Transcription Factor 1) ELISA Kit人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)免疫試劑盒
樟疫霉1號染色體開放閱讀框187抗體Human AP13(Apelin 13) ELISA Kit人可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)免疫試劑盒
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:D,99.8%Ⅲ型前膠原肽試劑盒半枝蓮堿
南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0%Ⅲ型前膠原基末端肽試劑盒白芷屬腦
死谷芽孢桿菌Bacillus│vallismortis 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC, ≥99.7%Ⅲ型前膠原基端肽試劑盒Α-波菜甾
PDE4抑制劑(Irsogladine)心鈉肽(ANP)檢測試劑盒英文名稱:ANP ELISA Kitα2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1包裝1g
心肌營養(yǎng)1(CT-1)檢測試劑盒英文名稱:CT-1 ELISA Kit凋亡相關(guān)蛋白3抗體包裝5g
心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)檢測試劑盒英文名稱:cTn-Ⅰ ELISA Kit肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體包裝1g
心肌肌鈣蛋白(cTn-Ⅰ)檢測試劑盒英文名稱:cTn-Ⅰ ELISA KitATP結(jié)合蛋白家族7抗體包裝25g
小扁豆結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)檢測試劑盒英文名稱:AFP-L3 ELISA KitASCL2蛋白抗體包裝5g
小扁豆結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)檢測試劑盒英文名稱:AFP-L2 ELISA Kit磷化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體包裝1g
小扁豆結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)檢測試劑盒英文名稱:AFP-L1 ELISA Kit磷化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝100g
腺苷高半胱(AHCY)檢測試劑盒英文名稱:AHCY ELISA Kit磷化活化復(fù)制因子2抗體包裝25g
腺病毒IgG抗體(ADV IgG)檢測試劑盒英文名稱:ADV IgG ELISA Kit磷化活化復(fù)制因子2抗體包裝500g
纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)檢測試劑盒英文名稱:TAFI ELISA Kit磷化活化復(fù)制因子2抗體包裝25g
纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)檢測試劑盒英文名稱:PAI-1 ELISA Kit磷化活化復(fù)制因子2抗體包裝5g
纖溶原激活劑抑制物(PAI-1)檢測試劑盒英文名稱:PAI-1 ELISA Kit磷化活化復(fù)制因子2抗體包裝10MG
纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)檢測試劑盒英文名稱:PAP ELISA Kit磷化活化復(fù)制因子2抗體包裝1mg
纖連蛋白(FN)檢測試劑盒英文名稱:FN ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體包裝5mg
細(xì)胞周期D3(Cyclin-D3)檢測試劑盒英文名稱:Cyclin-D3 ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體包裝5mg