產(chǎn)品屬性:
中文名稱:SYK抑制劑(RO9021)
英文名稱:RO9021
產(chǎn)品規(guī)格:1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
RO9021是一種可,ATP競(jìng)爭(zhēng)性的SYK抑制劑,IC50值為5.6nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1446790-62-0 純度:99.56% 分子量:355.44 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
解淀粉芽孢桿菌6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框226抗體Human C3a(Complement Component 3a) ELISA Kit人類肌腱蛋白(TN)免疫試劑盒
小鏈霉菌間隙連接蛋白30抗體Human BIRC7(Baculoviral IAP repeat-containing protein 7) ELISA Kit人類固抗體(SCA)免疫試劑盒
米根霉2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框69抗體Human BK(Bradykinin) ELISA Kit人類風(fēng)濕因子(RF)抗體(IgM)免疫試劑盒
大腸埃希菌3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框18抗體Human BLVRA(Biliverdin Reductase A) ELISA Kit人類風(fēng)濕因子(RF)抗體(IgG)免疫試劑盒
芽孢桿菌巨噬炎癥因子1β /MIP-1β抗體Human C3d(Complement Fragment 3d) ELISA Kit人類風(fēng)濕因子(RF)抗體(IgA)免疫試劑盒
草色串孢外基質(zhì)金屬蛋白誘導(dǎo)因子抗體Human C3b(Complement Fragment 3b) ELISA Kit人類風(fēng)濕因子(RF)免疫試劑盒
赭曲霉整合αM/巨噬表面分子抗體Human C3c(Complement Fragment 3c) ELISA Kit人類泛蛋白ISG15 免疫試劑盒
紙葡萄穗霉血小板內(nèi)皮黏附分子-1抗體Human ATGA/TGAB(Anti-Thyroid-Globulin Antibody) ELISA Kit人類白抗原G(HLA-G)免疫試劑盒
釀酒酵母血小板內(nèi)皮黏附分子1抗體Human ATXN1(Ataxin 1) ELISA Kit人類白抗原E(HLA-E)免疫試劑盒
德氏乳桿菌保加利亞亞種CD34抗體Human ATF-6(Activating Transcription Factor 6) ELISA Kit人類白抗原B27(HLA-B27)免疫試劑盒
疣青霉CD36抗體Human Aβ40(Amyloid Beta 40) ELISA Kit人雷帕霉靶蛋白(mTOR)免疫試劑盒
中國(guó)平臍蠕孢凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體Human ATGA/TGAB(Anti-Thyroid-Globulin Antibody) ELISA Kit人酪酰tRNA合成(YARS)免疫試劑盒
釀酒酵母凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體Human ATXN1(Ataxin 1) ELISA Kit人酪酰DNA 磷二酯1(TDP1)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體Human Aβ42(Amyloid Beta 42) ELISA Kit人酪羥化(TH)免疫試劑盒
大腸埃希菌4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框34抗體Human ARO(Aromatase) ELISA Kit人酪激2(Tyk-2)免疫試劑盒
pCMV-HA(pCMV-HA-N)酪蛋白激1γ3/CKI γ3抗體Human ARRβ1(Arrestin Beta 1) ELISA Kit人酪蛋白激受體TYRO3(TYRO3)免疫試劑盒
根瘤菌(檸條)Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:D,99.9%Ⅳ型膠原試劑盒檳榔堿
伊氏錐蟲(chóng)Trypanosoma│evansi 質(zhì)量規(guī)格:D,99.8%+TMS 0.03%4-羥基壬烯試劑盒別隱品堿
節(jié)桿菌Arthrobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:D,99.9%40S核糖體蛋白S19試劑盒3-表中國(guó)臺(tái)灣三尖杉?jí)A
SYK抑制劑(RO9021)血管緊張轉(zhuǎn)化2(ACE2)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ACE2 ELISA Kit芳香烴受體抗體包裝5g
血管緊張轉(zhuǎn)化(ACE)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ACE ELISA Kit吸引抗體包裝1g
血管緊張?jiān)?/span>(aGT)檢測(cè)試劑盒英文名稱:aGT ELISA Kit腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體包裝5g
血管緊張Ⅱ受體2(AT2R)檢測(cè)試劑盒英文名稱:AT2R ELISA Kit蛋白激B2包裝1g
血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ANG-Ⅱ ELISA Kit血管生成2抗體包裝25g
血管緊張Ⅰ(Ang-Ⅰ)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Ang-Ⅰ ELISA Kit芳香化/色P450/雌合成抗體包裝5g
血管緊張1-7(Ang1-7)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Ang1-7 ELISA Kit腺苷A2A受體抗體包裝1g
血管活性腸肽(VIP)檢測(cè)試劑盒英文名稱:VIP ELISA Kit蛋白激A錨定蛋白95抗體包裝25g
溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)檢測(cè)試劑盒英文名稱:BrdU ELISA Kit頂膜鈉依賴性膽鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體包裝5g
雄烯二(ASD)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ASD ELISA Kit去整合樣金屬蛋白8抗體包裝10MG
雄受體(AR)檢測(cè)試劑盒英文名稱:AR ELISA Kit芳香乙酰脫乙?;鶚拥鞍?抗體包裝50MG
性結(jié)合球蛋白(SHBG)檢測(cè)試劑盒英文名稱:SHBG ELISA KitACN9蛋白抗體包裝250mg
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Smad7 ELISA Kit雙鏈RNA腺苷脫基抗體(N端)包裝50MG
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子1(Smad1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Smad1 ELISA Kit腺苷單磷活化蛋白激α2抗體包裝5g
新生狀腺(NN-T4)檢測(cè)試劑盒英文名稱:NN-T4 ELISA Kit腺苷激抗體包裝25mg
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)