詳細介紹
商品介紹:
用途: 膠原、網狀纖維 注意事項: 含分化液,膠原、粗網狀纖維呈紫色至黑色、嗜銀細胞顆粒呈黑色。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
2×100ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
矮地茶(標準品)英文名稱: Fluorescein免疫球蛋超家族成員8抗體包裝5g
艾黃;六棱菊亭(標準品)英文名稱: Calcein白介33抗體包裝25g
艾葉(標準品)英文名稱: Wright's stain核蛋白9抗體(Ran結合蛋白M)包裝25ml
安格洛苷 C(標準品)英文名稱: Giemsa stain真核翻譯起始因子3A抗體包裝5ml
安石榴甙(標準品)英文名稱: 6-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester磷化真核翻譯起始因子4G抗體包裝1g
安五脂(標準品)英文名稱: 6-Carboxyfluorescein整合α4β7抗體包裝5g
安息香(標準品)英文名稱: 5-Carboxyfluorescein磷化干擾調節(jié)因子3抗體包裝10MG
澳茄新堿(標準品)英文名稱: Nigrosine water solubleISLR2蛋白抗體包裝1g
澳洲茄;澳州茄(標準品)英文名稱: Nigrosin alcohol solubleIQCG蛋白抗體包裝250mg
澳洲茄邊堿(標準品)英文名稱: 7-HydroxycoumarinIQCK蛋白抗體包裝1g
澳洲茄堿(標準品)英文名稱: HeminDNA結合抑制因子1抗體包裝250mg
八角楓(標準品)英文名稱: 5-Carboxyfluorescein diacetate肌苷單磷脫氫1抗體包裝25g
八角茴香(標準品)英文名稱: 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate干擾誘導蛋白P78抗體包裝5g
八角蓮(標準品)英文名稱: 5-Aminofluorescein間粘附分子5抗體包裝100g
八角麻(標準品)英文名稱: 6-Aminofluorescein肌單磷IMPA3抗體包裝25g
#固氮菌Azotobacter│sp. 質量規(guī)格:Mw:63000~77000,USP32類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 絞股藍皂苷XLIX;Gypenoside
微桿菌屬Microbacterium│sp. 質量規(guī)格:Mw35 000 to 45 000類似cDNA順序BC027382 絞股藍皂苷;Gynostemma Pen
猴頭菇Hericium│erinaceus 質量規(guī)格:MW:16000~24000類免疫缺陷病試劑盒5-O-基維斯阿米苷;5-O-Met
Thomas磷鉬酸蘇木素染色液費爾氏酵母 3,5-二溴苯甲酪氨酸羥化Elisa
釀酒酵母 甘氨酰-L-谷氨酸色C氧化Elisa
大毛霉 Ketanserin鞘氨-1-磷酸Elisa
稻田彎曲嗜酸 二甲基二烯基氯化銨鞘氨Elisa
朱黃籃狀 烯酸二環(huán)戊基酯堿性焦磷酸Elisa
膠孢 二乙氧基烷苯氨酸解氨Elisa
小孢根霉須狀變種 西洛他唑磺基轉移 1A1Elisa
假單胞屬 4-(二氟甲氧基)苯甲磺基轉移 2A1Elisa
新城疫病 4-Boc-氨基β-酮脂酰-CoA合Elisa
核盤 2,4,6-三氯苯酸β-酮脂酰-CoA合Elisa
芽胞桿 1-庚炔-3-纖維Elisa
溶淀粉類芽孢桿 叔丁氧羰基-L-谷氨酸 5-環(huán)己酯3-氧?;??;d體蛋白還原Elisa
岸邊亞硫酸鹽桿 1,2-雙(基硅氧基)乙烷油體相關蛋白Elisa
樟疫霉 對氨基苯甲酰-β-氨酸末端脫氧核糖核酸轉移Elisa
深層大洋芽孢桿 泛影酸鈉末端脫氧核糖核酸轉移Elisa