以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
uPA抑制劑(UK-371804) | UK-371804 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
UK-371804是尿嘧啶型纖溶酶原激活物(uPA)的抑制劑,Ki值為10nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):256477-09-5 純度:98.0% 分子量:385.83 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
金針菇組織蛋白G抗體Human RAG1(V(D)J recombination-activating protein 1) ELISA Kit人法尼基二磷法尼基轉(zhuǎn)移1(FDFT1)免疫試劑盒
解脂鹽紅菌激分子B7-1蛋白抗體Human DUT(Deoxyuridine 5′-triphosphate nucleotidohydrolase, mitochondrial) ELISA Kit人法尼X受體(FXR)免疫試劑盒
鴨疫里氏桿菌1號(hào)染色體開放閱讀框145抗體Human SCARB1(Scavenger receptor class B member 1) ELISA Kit人二?;视?DAG/DG)免疫試劑盒
南類芽孢桿菌20號(hào)染色體開放閱讀框186抗體Human NFATC1(Nuclear factor of activated T-cells, cytoplasmic 1) ELISA Kit人二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)免疫試劑盒
猬木霉角蛋白7抗體Human HTN3(Histatin-3) ELISA Kit人二氫嘧啶脫氫[NADP+](DPYD)免疫試劑盒
溶血不動(dòng)桿菌基因型4間隙連接蛋白26抗體Human SRD5A1(3-oxo-5-alpha-steroid 4-dehydrogenase 1) ELISA Kit人二氫嘧啶樣3(DPYSL3)免疫試劑盒
貝倫格葡萄座腔菌膜輔蛋白抗體Human EPCA2(Early Prostate Cancer Antigen 2) ELISA Kit人二氫嘧啶樣2(DPYSL2)免疫試劑盒
鴨疫里氏桿菌F肌動(dòng)蛋白α1亞基抗體Human MADCAM1(Mucosal addressin cell adhesion molecule 1) ELISA Kit人二羥基賴正己(DHLNL)免疫試劑盒
抗生鏈霉菌CD8抗體Human NEO1(Neogenin) ELISA Kit人二磷腺苷(ADP)免疫試劑盒
黃桿菌CD8抗體Human NAIP(Baculoviral IAP repeat-containing protein 1) ELISA Kit人二磷尿核苷葡糖基轉(zhuǎn)移2家族肽B4(UGT2B4)免疫試劑盒
小孢根霉原變種表面趨化因子受體2抗體Human PACRG(Parkin coregulated gene protein) ELISA Kit人二氧化(DAO)免疫試劑盒
中慢生根瘤菌胱抑B/半胱蛋白抑制劑B抗體Human CX3CR1(CX3C chemokine receptor 1) ELISA Kit人兒茶酚抑免疫試劑盒
溜曲霉趨化樣蛋白抗體Human JUP(Junction plakoglobin) ELISA Kit人兒茶酚(CA)免疫試劑盒
多孢木霉角蛋白20抗體Human CFL1(Cofilin-1) ELISA Kit人鵝膏蕈堿免疫試劑盒
蘇云金芽胞桿菌鈣激活的中性蛋白2抗體Human EPCA2(Early Prostate Cancer Antigen 2) ELISA Kit人多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)免疫試劑盒
臭曲霉CD45RO抗體Human IZUMO1(Izumo sperm-egg fusion protein 1) ELISA Kit人多效生長(zhǎng)因子(PTN)免疫試劑盒
短鏈孢霉屬Selenotila│sp. 質(zhì)量規(guī)格:鈉型榿木
根霉Rhizopus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:for GC,≥99.5%(GC)款冬
Methanobrevibacter smithiiMethanobrevibacter smithii 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)偽原薯蕷皂苷
uPA抑制劑(UK-371804)補(bǔ)體蛋白3(C3)檢測(cè)試劑盒英文名稱:C3 ELISA Kit血管生成相關(guān)蛋白5包裝5g
補(bǔ)體C4(C4)檢測(cè)試劑盒英文名稱:C4 ELISA Kit錨蛋白重復(fù)域53抗體包裝1g
補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)檢測(cè)試劑盒英文名稱:C1INH ELISA Kit錨蛋白重復(fù)域54抗體包裝1g
波形蛋白(VIM)檢測(cè)試劑盒英文名稱:VIM ELISA Kiβ5抗體包裝1g
脫氫E1(PDH E1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:PDH E1 ELISA Kit肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白3抗體包裝5g
激M2型同工(M2-PK)檢測(cè)試劑盒英文名稱:M2-PK ELISA Kit腺苷A2b受體/神經(jīng)生長(zhǎng)因子1受體抗體包裝10MG
激(PK)檢測(cè)試劑盒英文名稱:PK ELISA Kit肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白1抗體包裝1g
二單酰(malonyl CoA)檢測(cè)試劑盒英文名稱:malonyl CoA ELISA Kitβ淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體(X11β)包裝5g
二醛(MDA)檢測(cè)試劑盒英文名稱:MDA ELISA Kit乙酰結(jié)合蛋白抗體包裝100g
轉(zhuǎn)/谷轉(zhuǎn)(ALT/GPT)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ALT/GPT ELISA Kit磷化分裂周期蛋白16抗體包裝25g
轉(zhuǎn)(ALT)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ALT ELISA Kit白血病相關(guān)蛋白AHI1抗體包裝1g
表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)檢測(cè)試劑盒英文名稱:EGFR ELISA Kit活化誘導(dǎo)胞嘧啶核苷脫抗體包裝5g
表皮生長(zhǎng)因子(EGF)檢測(cè)試劑盒英文名稱:EGF ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9抗體包裝1g
吡啶交聯(lián)物(PY)檢測(cè)試劑盒英文名稱:PY ELISA KitADP核糖基化因子3抗體包裝100g
(LPA)檢測(cè)試劑盒英文名稱:LPA ELISA Kit含酰tRNA合成結(jié)構(gòu)域1抗體包裝25g